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中級(jí)會(huì)員 | 第16年

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透析袋使用注意事項(xiàng)

時(shí)間:2014/8/19閱讀:4827
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 透析即用半透膜(透析袋)將大分子蛋白質(zhì)分離出來(lái)。在生物大分子制備過(guò)程中除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品,透析法zui簡(jiǎn)便。
技術(shù)指標(biāo):MWCO(截留分子量),單位:Diatoms 。
透析時(shí),小于MWCO的分子在透析膜二邊溶液濃度差產(chǎn)生的擴(kuò)散壓作用下滲過(guò)透析膜,其速度與濃度梯度、膜面積及溫度成正比。欲快速透析可采用直徑較小的透析袋以增加膜面積。常用溫度:4℃,升溫、更換袋外透析液或用磁力攪拌器,均能提高透析速度。
使 用 須 知
1某些化學(xué)物質(zhì)會(huì)破壞透析袋微孔且不可逆轉(zhuǎn)。計(jì)有:
烴、鹵化烴、醇、酮、酯、胺、丙酮、二氧雜環(huán)乙烷、環(huán)已烷等。
酸(甲酸、乙酸、稀強(qiáng)酸如5%HCI),10%苯酚,30%雙氧水。
甲醇、乙醇:濃度小于5%時(shí),透析功能在,而MWCO變化。
2蛋白質(zhì)吸附量,小于1ug/克,(以透析袋干重計(jì))。
正常使用PH值5-9(可重復(fù)使用)。
極限使用PH值2-12(一次性使用)。
3前處理:煮沸5分鐘后用蒸餾水60℃洗沖2分鐘,置4℃蒸餾水中待用。
長(zhǎng)期保存液:0。05%-0。1%疊氮鈉,1mMEDTA或50%甘油,溫度(4℃),使用前以蒸餾水洗凈。
4即用型透析袋毋須前處理,使用前用蒸餾水洗凈即可。
5透析袋裝液時(shí)應(yīng)留1/3-1/2空間,以防透析過(guò)程中,袋外的水和緩沖液過(guò)量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破(含鹽量高的蛋白質(zhì)溶液透析隔夜時(shí),體積增加50%系正常情況)。
6使用時(shí)須戴手套。
7透析效果檢查用 1%氯化鋇 檢查硫酸銨、硫酸鈉
1%硝酸銀 檢查氯化鈉、氯化鉀[/size] 



 

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