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液相色譜柱使用過程中該如何維護(hù)？

閱讀：3060 發(fā)布時(shí)間：2021-7-22

一、使用過程中的維護(hù)

1、流動(dòng)相的使用和分析方法的選擇

流動(dòng)相的純度、溶劑的選擇、適當(dāng)分析方法的使用與色譜柱的性能和壽命密切相關(guān)。

1.1 流動(dòng)相的選擇

所選用的流動(dòng)相應(yīng)與色譜柱、待分析樣品相兼容，即樣品、樣品溶液和流動(dòng)相是互溶的。流動(dòng)相能夠溶解樣品，避免樣品沉淀析出；同時(shí)還要求流動(dòng)相與樣品不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并且要求與色譜柱不能發(fā)生溶解或化學(xué)反應(yīng)。

色譜分析應(yīng)選擇色譜級(jí)的流動(dòng)相。通常分析純的溶劑含有微量雜質(zhì)，如有機(jī)溶劑中的聚乙二醇、無機(jī)鐵離子（Fe+）等，作為流動(dòng)相大量使用后會(huì)引起色譜柱性能變化。最好是使用色譜純級(jí)或者更高純度的試劑，盡量降低溶劑中雜質(zhì)帶來的損傷。

1.2 流動(dòng)相過濾

使用色譜純?cè)噭┡渲屏鲃?dòng)相，使用前需經(jīng)0.45μm或者更小孔徑的濾膜過濾和超聲脫氣處理，減少灰塵、微生物等雜質(zhì)堵塞色譜柱，尤其是水溶性流動(dòng)相易引起微生物生長而造成色譜柱阻塞。流動(dòng)相最好是現(xiàn)配現(xiàn)用，放置時(shí)間最好不要超過2天。

1.3 流動(dòng)相的pH和緩沖鹽的選擇

極端pH的流動(dòng)相會(huì)破壞填料內(nèi)的共價(jià)鍵，“溶解”硅膠，使固定相流失，從而降低柱效，縮短使用壽命。以硅膠作基質(zhì)的固定相一般要求pH在2.5~7范圍內(nèi)使用。長期在pH>7或pH<2使用環(huán)境中，硅膠會(huì)逐漸溶解或者表面鍵合的官能團(tuán)會(huì)逐漸流失。如果一定要用高或低pH的流動(dòng)相，最好是選用相適應(yīng)的色譜填料。

1.4 流速的控制

目前粒徑為1.8μm的UPLC的流速常設(shè)為0.3~0.5mL/min，粒徑為5μm的HPLC分析流速不大于1.5mL/min，粒徑為10μm半制備柱流速控制在3mL/min。流速過大，壓力升高，會(huì)引起色譜填料沖垮、塌陷。

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