生物芯片法檢測(cè)沙眼衣原體抗體

    [檢測(cè)方法]  生物芯片法

    [方法學(xué)原理]  以微孔濾膜為載體，利用微陣列技術(shù)將純化的沙眼衣原體（CT）特異性蛋白固定于同一膜片上，并利用微孔濾膜的滲濾、濃縮、凝集作用，使抗原抗體反應(yīng)在固相膜上快速進(jìn)行，再以免疫金作為標(biāo)記物直接在膜上顯色。顯色后的芯片放人芯片識(shí)別儀，在軟件的支持下對(duì)不同點(diǎn)陣的灰度值進(jìn)行分析。

    [標(biāo)本準(zhǔn)備]  取新鮮末梢血或靜脈血，分離血清后，如果試驗(yàn)在采血后24h不能進(jìn)行，應(yīng)將其在-20℃環(huán)境中保存。檢測(cè)時(shí)，應(yīng)使樣本恢復(fù)至室溫。

    [試劑]

    1．蛋白芯片

    2．試劑A（洗滌液）

    3．試劑B（金溶膠試劑）

    [儀器]  蛋白芯片檢測(cè)系統(tǒng)

    [檢測(cè)步驟]

    1．在芯片上標(biāo)記樣品編號(hào)。

    2．在芯片盒窗口內(nèi)滴加4滴試劑A，使膜表面*浸濕。

    3．待*滲入后，室溫環(huán)境中放置lmin，加待檢血清100u1。

    4．待血清*滲入后，及時(shí)滴加6滴試劑B。

    5．待試劑B*滲入后，滴加6滴試劑A。

    6．反應(yīng)完畢后30rain內(nèi)，將芯片放人餅片閱讀系統(tǒng)進(jìn)行分析。

    [結(jié)果判斷]

    檢測(cè)結(jié)果1：CT陰性，提示沒(méi)有被感染。

    檢測(cè)結(jié)果2：CT陽(yáng)性，提示被CT感染。

    [正常參考值]  沙眼衣原體抗體陰性

    [注意事項(xiàng)]

    1．從2～8℃環(huán)境中取出的芯片須在室溫環(huán)境中平衡至少10min后方可使用。

    2．采取血樣時(shí)患者無(wú)須禁食。

    3．新鮮血樣在2～8℃環(huán)境下存放不要超過(guò)48h；長(zhǎng)期保存的樣本應(yīng)在-20℃以下環(huán)境中凍存，避免反復(fù)凍融。

    4．芯片反應(yīng)窗口中的膜不能損傷或受潮：

    l芯片應(yīng)在有效期內(nèi)使用。若陽(yáng)性控制點(diǎn)不顯色說(shuō)明芯片已失效，換新的芯片重做。

    6．殘余的標(biāo)本與使用過(guò)的芯片盒按生物危險(xiǎn)品進(jìn)行消毒處理。

    7．操作時(shí)要戴手套，檢測(cè)完畢*洗手。

    8．如不慎讓任何試劑接觸眼部，立即用大量清水沖洗。

    9．其他問(wèn)題請(qǐng)參見(jiàn)芯片操作指南或與本公司。

    [臨床意義]  沙眼衣原體有15種血清型，其中A、B、Ba、C等4種血清型主要與地方性沙眼有關(guān)；D～K型可在生殖道感染、結(jié)膜炎和嬰兒肺炎中發(fā)現(xiàn)；L1、L2、L3等3種血清型可引起性病淋巴肉芽腫。泌尿生殖道疾病如女性的宮頸炎、盆腔炎、子宮內(nèi)膜炎、男性的附睪炎、兩性的尿道炎、直腸炎均可由沙眼衣原體引起。

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