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深圳市科潤達生物工程有限公司
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麻疹病毒 IgG抗體親和力檢測試劑盒的技術要求

時間:2025/6/10閱讀:223
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麻疹病毒IgG抗體親和力檢測試劑盒的技術要求主要體現(xiàn)在方法學、樣本處理、檢測流程、結果判定等方面,具體如下:  
方法學與原理  
基于ELISA技術:特異性抗體的定性免疫酶學檢測基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術。微孔板上包被特定的抗原,以結合樣本的相應抗體。通過一系列步驟,如洗滌去除未結合的樣本材料、用親和試劑孵育微孔等,最終加入四甲基聯(lián)苯胺(TMB)底物,得到藍色反應產物,加入終止液后產生黃色端點顏色,測量在450/620nm處的吸光度,該強度與樣本中特異性抗體的數(shù)量成正比。  
區(qū)分感染類型:基于暴露于免疫原后抗體親和力逐漸增加的證據(jù),IgG抗體的親和力可作為區(qū)分近期原發(fā)感染和長期感染的標志物。低親和力的IgG抗體表明是原發(fā)性感染,而存在高親和力的IgG抗體表明感染的持續(xù)或重新激活。  
樣本要求  
樣本類型:可用于檢測人血清和血漿中麻疹病毒IgG抗體的親和力。  
樣本質量:避免檢測高度溶血的樣本和有微生物污染的樣本,以免出現(xiàn)錯誤的結果。  
檢測流程要求  
試劑準備:試劑盒需包含如親和試劑(藍色,即用型;黑色帽)、低質控品(黃色;即用型;藍色帽;≤0.02%(v/v)MIT)、高質控品(黃色;即用型;紅色帽;≤0.02%(v/v)MIT)等必要材料,并附有詳細的使用說明書(如產品編號:AMEA7330等)。  
操作步驟:  
抗原抗體結合:微孔板上包被特定的抗原,加入樣本后,特異性IgG抗體與抗原結合。  
親和試劑處理:用親和試劑孵育微孔,親和試劑從抗原中去除低親和抗體,而高親和抗體仍然與特定的抗原結合。  
洗滌:進行第二步洗滌以去除剩余的親和試劑和低親和力抗體。  
酶標記結合:添加辣根過氧化物酶(HRP)標記的偶聯(lián)物,這種結合物與捕獲的抗體結合。  
再次洗滌:在第三個洗滌步驟中,去除未結合的共軛物。  
顯色與終止:通過加入四甲基聯(lián)苯胺(TMB)底物顯色,加入終止液以終止反應。  
吸光度測量:測量在450/620nm處的吸光度。  
結果判定要求  
依據(jù)吸光度:根據(jù)在450/620nm處測量的吸光度值,結合標準曲線或相關判定標準,判斷樣本中麻疹病毒IgG抗體的親和力情況,從而區(qū)分急性和既往感染。  
性能指標要求  
高特異性與靈敏度:利用麻疹病毒抗原捕獲IgG抗體,避免與其他病毒交叉反應,具有高特異性;酶標記抗體放大檢測信號,可精確測量低水平抗體,具有高靈敏度。  
穩(wěn)定性:試劑盒在規(guī)定的儲存條件下(如2-8℃)應具有一定的穩(wěn)定性,以保證檢測結果的可靠性。  
質量控制要求  
質控品使用:使用低質控品和高質控品進行質量控制,確保檢測過程的準確性和可靠性。  
重復性:試劑盒應具有良好的重復性,以保證不同批次檢測結果的一致性。

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