13
HPLC/UHPLC兼容色譜柱容量溫度和清洗
HPLC/UHPLC兼容色譜柱檢測的分辨率和靈敏度高，分析速度快，重復性好，定量精度高，應用范圍廣。適用于分析高沸點、大分子、強極性、熱穩(wěn)定性差的化合物。
HPLC/UHPLC兼容色譜柱容量是指色譜柱對一種溶質可容納的zui大量值，一旦超過此數值，該溶質的色譜峰就會發(fā)生畸變，也就是說該溶質超載。超載的色譜峰并不均衡而且沿固定方向變化。
HPLC/UHPLC兼容色譜柱溫度極限：
一根色譜柱通常有兩個溫度極限，溫度下限和溫度上限。如果在低于溫度下限的條件下實驗，得到的色譜峰又圓又寬(柱效降低)。但是色譜柱并不會受到什么損壞。這樣并不能發(fā)揮色譜柱的正常功能。在達到下限溫度或者高于下限溫度時，得到的色譜峰會有明顯的好轉。
HPLC/UHPLC兼容色譜柱清洗步驟：
1.每次清洗都用低流速起步，當檢測到柱壓穩(wěn)定在一定水平后再增加流速。
2.先用10柱體積不含其它添加劑的流動相中的弱溶劑，如正己烷、氯仿等反沖色譜柱。
3.再用20柱體積的諸如二氯甲烷或異丙醇等流動相中的強溶劑反沖色譜柱。
4.100%異丙醇的極性和正相洗脫能力足夠把正相柱上的所有殘留物清洗掉。如果異丙醇的清洗還不足以恢復色譜性能，則說明色譜柱柱床有塌陷和空洞了，用清洗的方法無法解決這個問題。色譜癥狀和清洗再生過后的色譜性能恢復情況往往能提供色譜柱真正存在問題的線索。