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尿液中安非他明和甲安非他明固相萃取凈化方法

閱讀:2934        發(fā)布時(shí)間:2010-5-25

 

尿液中安非他明和甲安非他明固相萃取凈化方法
1. 樣品預(yù)處理
1mL尿液中加入 500μL0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.0),充分混合;
2. SPE凈化
注意:所有過(guò)程流速均維持2~3mL/min。
a. 活化:SPEC柱中加入200μL甲醇,靜置1min;
b. 上樣:將預(yù)處理過(guò)的樣品載入SPE柱,并打開真空閥抽吸;
c. 淋洗:用500μL 0.1mol/L的醋酸淋洗SPEC柱,增大真空度,維持1min,抽干;再用500μL甲醇淋洗SPEC柱,增大真空度,維持1min,抽干;
d. 洗脫:用800μL洗脫溶劑(80mL乙酸乙酯,20mL甲醇,2mL氨水充分混合)洗脫,控制較溫和的真空度,使洗脫溶劑緩慢流經(jīng)SPEC萃取盤,收集全部洗脫液;
3. 衍生化
a. 洗脫液中加入50μL 1%的酸性甲醇,充分振搖;
b. 35℃氮吹干燥(要緩慢干燥);
c. 加入50μL七氟丁酸酐(HFBA),密封后充分混合,70℃加熱2min,冷卻至室溫;
d. 加入700μL乙酸乙酯,密封振搖。
4. GC-MS檢測(cè)
5. 樣品成分
安非他明
甲安非他明

方法中使用的SPE柱:
SPEC DAU( 3mL, PN. A532 DAU)。

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