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酵母基因組DNA提取試劑盒在使用時(shí)應(yīng)注意什么？

閱讀：648 發(fā)布時(shí)間：2024-1-26

酵母基因組DNA提取試劑盒用于快速的從酵母中提取基因組DNA。在針對(duì)酵母細(xì)胞特點(diǎn)配制的酵母裂解液作用下，酵母細(xì)胞被裂解釋放出基因組DNA，然后蛋白沉淀液選擇性沉淀去除蛋白，然后純凈的基因組DNA通過(guò)異丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

酵母基因組DNA提取試劑盒使用的注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下可保存12個(gè)月，更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。

2、如果實(shí)驗(yàn)中的離心步驟出現(xiàn)堵柱子的情況，可適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間。

3、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

4、如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響效果。

5、酵母細(xì)胞量不宜過(guò)大，一般不超過(guò)5×10 7 cells，如果酵母細(xì)胞量太大會(huì)影響酵母細(xì)胞的破壁效果，從而影響酵母基因組DNA的得率。

6、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul，體積過(guò)小會(huì)影響回收效率；洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)此范圍)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。