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淄博山分分析儀器有限公司
中級會(huì)員 | 第13年

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六通閥的清洗

時(shí)間:2013/11/1閱讀:4282
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  1、六通閥的清洗 在INJECT位置,把針孔清洗器(Needle Port Cleaner,Part No.7125-054)套在1ml注射器上,注射器事先吸取1mL流動(dòng)相,慢推即可清洗六通閥,隨后推一針空氣,把孔道里面的液體吹盡。  實(shí)際上,找個(gè)操作是清洗導(dǎo)針孔道,就是六通閥里有孔的塑料管。每次進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣針殘留的樣品溶液會(huì)粘附在這個(gè)塑料管上,會(huì)污染下一次進(jìn)樣,一般幾十針進(jìn)樣后需清洗一次。更換分析樣品時(shí)須先清洗。   對于樓主頂層的問題,如果你清洗后沒有把導(dǎo)針孔道的液體吹干的話,液體就會(huì)進(jìn)入HPLC系統(tǒng)中,不過,一般清洗液都是選擇流動(dòng)相,故不會(huì)有太大的危害。先吹干再進(jìn)樣。 定量環(huán)一般不用清洗,因?yàn)槊看芜M(jìn)樣時(shí)流動(dòng)相已經(jīng)在沖洗了。   2、滿環(huán)進(jìn)樣與非滿環(huán)進(jìn)樣    滿環(huán)進(jìn)樣是以超過定量環(huán)體積的量進(jìn)樣,如20uL定量環(huán)滿環(huán)進(jìn)樣可用大于20uL的液體進(jìn)樣,而實(shí)際進(jìn)入HPLC系統(tǒng)的體積就是定量環(huán)的體積(一般用2-5倍定量環(huán)體積進(jìn)樣,6-10倍進(jìn)樣準(zhǔn)確性更佳)。   非滿環(huán)進(jìn)樣是以小于定量環(huán)體積的量進(jìn)樣,一般不超過定量環(huán)體積的一半(層流效應(yīng),流體中心流速大于管壁流體的流速)。20uL定量環(huán)采用非滿環(huán)進(jìn)樣應(yīng)小于10uL。進(jìn)樣體積從進(jìn)樣器上讀出。樣品較少時(shí)可以用非滿環(huán)進(jìn)樣方式進(jìn)樣。    3、關(guān)于進(jìn)樣量  進(jìn)樣量是進(jìn)入HPLC系統(tǒng)的樣品的質(zhì)量或物質(zhì)的量。滿環(huán)進(jìn)樣時(shí)常以濃度表示(體積一定),進(jìn)樣濃度一樣時(shí)可以進(jìn)樣體積表示(濃度一定)。統(tǒng)一換算成質(zhì)量或物質(zhì)的量。   從以往的帖子看,樓主在做多糖的SEC,生物高分子的溶液粘度大,不可能配制很高濃度的溶液,一般以稀溶液進(jìn)行分析。此時(shí),進(jìn)樣體積的多少對分析的結(jié)果會(huì)存在一定影響(如峰擴(kuò)展和柱過載)。鑒于此,應(yīng)對進(jìn)樣的體積進(jìn)行試驗(yàn),選擇對結(jié)果影響較小的體積(范圍)進(jìn)樣。    對一般HPLC的定量分析而言,較少研究進(jìn)樣體積的影響(此時(shí),進(jìn)樣量遠(yuǎn)小于柱的zui大容量),而制備色譜中此問題則需要考慮。  

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