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當前位置:淄博山分分析儀器有限公司>>技術文章>>六通閥的清洗
1、六通閥的清洗 在INJECT位置,把針孔清洗器(Needle Port Cleaner,Part No.7125-054)套在1ml注射器上,注射器事先吸取1mL流動相,慢推即可清洗六通閥,隨后推一針空氣,把孔道里面的液體吹盡。 實際上,找個操作是清洗導針孔道,就是六通閥里有孔的塑料管。每次進樣時,進樣針殘留的樣品溶液會粘附在這個塑料管上,會污染下一次進樣,一般幾十針進樣后需清洗一次。更換分析樣品時須先清洗。 對于樓主頂層的問題,如果你清洗后沒有把導針孔道的液體吹干的話,液體就會進入HPLC系統(tǒng)中,不過,一般清洗液都是選擇流動相,故不會有太大的危害。先吹干再進樣。 定量環(huán)一般不用清洗,因為每次進樣時流動相已經(jīng)在沖洗了。 2、滿環(huán)進樣與非滿環(huán)進樣 滿環(huán)進樣是以超過定量環(huán)體積的量進樣,如20uL定量環(huán)滿環(huán)進樣可用大于20uL的液體進樣,而實際進入HPLC系統(tǒng)的體積就是定量環(huán)的體積(一般用2-5倍定量環(huán)體積進樣,6-10倍進樣準確性更佳)。 非滿環(huán)進樣是以小于定量環(huán)體積的量進樣,一般不超過定量環(huán)體積的一半(層流效應,流體中心流速大于管壁流體的流速)。20uL定量環(huán)采用非滿環(huán)進樣應小于10uL。進樣體積從進樣器上讀出。樣品較少時可以用非滿環(huán)進樣方式進樣。 3、關于進樣量 進樣量是進入HPLC系統(tǒng)的樣品的質(zhì)量或物質(zhì)的量。滿環(huán)進樣時常以濃度表示(體積一定),進樣濃度一樣時可以進樣體積表示(濃度一定)。統(tǒng)一換算成質(zhì)量或物質(zhì)的量。 從以往的帖子看,樓主在做多糖的SEC,生物高分子的溶液粘度大,不可能配制很高濃度的溶液,一般以稀溶液進行分析。此時,進樣體積的多少對分析的結(jié)果會存在一定影響(如峰擴展和柱過載)。鑒于此,應對進樣的體積進行試驗,選擇對結(jié)果影響較小的體積(范圍)進樣。 對一般HPLC的定量分析而言,較少研究進樣體積的影響(此時,進樣量遠小于柱的zui大容量),而制備色譜中此問題則需要考慮。
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