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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司

ELISA試劑盒研究的一般工具與方法

時(shí)間:2014-7-25閱讀:967

隨著人類基因組計(jì)劃取得巨大的成功和許多物種基因組測(cè)序的完成,僅僅靠基因組的序列來(lái)試圖闡明生命現(xiàn)象是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的,因此,ELISA試劑盒研究重心已經(jīng)開(kāi)始從揭示生命的所有遺傳信息轉(zhuǎn)移到在分子整體水平對(duì)功能的研究上,生命科學(xué)已實(shí)質(zhì)性地跨入了后基因組時(shí)代。
盡管現(xiàn)在已經(jīng)有多個(gè)物種的基因組被測(cè)序,但這些基因組中通常有一半以上基因的功能是未知的。
ELISA試劑盒目前功能基因組研究中所采用的策略,如微陣列法(microarray)(Wodicka et al.,1997)、基因芯片(gene chips)(Ramsay et al.,1998)、基因表達(dá)序列分析(SAGE)(Velculescu et al.,1995)等,都是從細(xì)胞中mRNA的角度來(lái)考慮的。但事實(shí)上,從DNA、mRNA到蛋白質(zhì)存在三個(gè)層次的調(diào)控,mRNA自身也存在著貯存、轉(zhuǎn)運(yùn)和降解等問(wèn)題,從mRNA角度考慮,實(shí)際上僅包括了轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控,并不能全面代表蛋白質(zhì)表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)也證明,組織中mRNA豐度與蛋白質(zhì)豐度的相關(guān)性并不好,尤其對(duì)于低豐度蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō),相關(guān)性更差。蛋白質(zhì)復(fù)雜的翻譯后修飾,蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位或遷移,蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用則幾乎無(wú)法從mRNA水平來(lái)判斷(曾嶸,夏其昌,2002)。新生肽鏈合成后存在多種加工、修飾過(guò)程,蛋白質(zhì)間也存在類似于mRNA分子內(nèi)的剪切、拼接,研究證明基本元件“intein”廣泛存在于蛋白質(zhì)中(Perler et al.,1997)?;蚺c其編碼產(chǎn)物蛋白的線性對(duì)應(yīng)關(guān)系只存在于新生肽鏈而不是zui終的功能蛋白質(zhì)中。
ELISA試劑盒是生理功能的執(zhí)行者和生命現(xiàn)象的直接體現(xiàn)者,對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的研究將直接闡明生命在生理或病理?xiàng)l件下的變化機(jī)制;蛋白質(zhì)本身的存在形式和活動(dòng)規(guī)律,如翻譯后修飾、蛋白質(zhì)間相互作用及蛋白質(zhì)構(gòu)象等問(wèn)題,仍依賴于直接對(duì)蛋白質(zhì)的研究來(lái)解決。因此要對(duì)生命的復(fù)雜活動(dòng)有全面和深入的認(rèn)識(shí),必然要在整體、動(dòng)態(tài)、網(wǎng)絡(luò)的水平上對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行研究

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