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C18液相色譜柱的柱洗方法

閱讀：1770      發(fā)布時(shí)間：2023-2-27
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c18液相色譜柱是實(shí)驗(yàn)室的通用型色譜柱。填料是硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基，有較高的碳含量和較好的疏水性，適用于大多數(shù)化合物，包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質(zhì)。
柱洗：
第一、安捷倫的色譜柱有很多種，所以要分清類型去沖洗。
第二、作為普通C18柱，尤其是硅膠基質(zhì)的普通C18柱，對酸堿鹽以及水，都是造成柱子的損壞的流動(dòng)相構(gòu)成。水不能過多（除了帶AQ的純水柱，一般各家品牌都有這款防水柱）我個(gè)人認(rèn)為只要超過80%的水的流動(dòng)相，都會(huì)造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動(dòng)相分析時(shí)請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的，一定要控制PH，我個(gè)人認(rèn)為PH在2以下的都要做好費(fèi)柱子的準(zhǔn)備。堿性條件是對于硅膠基質(zhì)的C18的弱項(xiàng)，一般的硅膠基質(zhì)的C18堿性條件都不太耐用，但現(xiàn)在也有堿性PH11的柱子，但比較貴。
第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據(jù)使用的流動(dòng)相和樣品的不同沖洗方法要加以區(qū)分。一般不加酸堿鹽，水相也不高的情況（如甲醇水60:40），無需太過沖洗，沖洗的目的就是為了把樣品的雜質(zhì)沖出即可。保存流動(dòng)相保存即可。酸和堿的條件下，原則上是將酸堿沖出色譜柱，保存在甲醇水即可（如60:40比例可根據(jù)要使用的流動(dòng)相，只要水相不高即可）。

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