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當(dāng)前位置：上海旦鼎國(guó)際貿(mào)易有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>離心機(jī)提取乳酸脫氫酶及輔酶具體操作說明
離心機(jī)，想必很多人一聽到這個(gè)詞就知道這不就是實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備其中之一嘛。是的，說起離心機(jī)，大家都會(huì)聯(lián)想到很多。臺(tái)式離心機(jī)可以應(yīng)用于乳酸脫氫酶及輔酶的提取。乳酸脫氫酶，是一種不需氧脫氫酶，以輔酶I（NAD﹢）為輔酶，催化乳酸與丙酮酸的可逆的氧化還原反應(yīng)。肌肉中含有大量的乳酸脫氫酶，在乳酸含量較高及氧氣充足情況下，催化乳酸生成丙酮酸，體外實(shí)驗(yàn)中，為觀察方便，在隔絕空氣后以甲烯藍(lán)作為受氫體，井用固定反應(yīng)中生成的丙酮酸，而使乳酸全部轉(zhuǎn)化為丙酮酸。今天我們對(duì)如何通過臺(tái)式離心機(jī)提取乳酸脫氫酶及輔酶I進(jìn)行介紹。 通過離心提取乳酸脫氫酶及輔酶用到的材料、試劑及設(shè)備有：（1）動(dòng)物后腿肌肉；（2）9g/LNaCl溶液；（3）活性炭；（4）10g/L乳酸鋰溶液；（5）5g/LKCN溶液；（6）乳缽；（7）臺(tái)式離心機(jī)等 具體操作方法： 1．輔酶I（NAD﹢）的制備：取動(dòng)物后腿肌肉2g置沸水浴中煮沸4—5分鐘（抑制酶的活力，防止將輔酶I破壞），取出冷卻、剪碎，加入少許9g/LNaCl溶液及細(xì)沙用乳缽研磨成糊狀，再加9g/LNaCl溶液8ml混勻，利用臺(tái)式離心機(jī)進(jìn)行離心沉淀，收集上清液，儲(chǔ)冰箱備用。 2．乳酸脫氫酶酶蛋白的提?。喝?dòng)物后腿肌肉2g置乳缽中，加入少許9g/LNaCl溶液及細(xì)砂，仔細(xì)研磨后再加9g/LNaCl溶液8ml混勻，用雙層紗布過濾，濾液加活性炭0.5g振搖數(shù)分鐘后放置半小時(shí)，并時(shí)常搖動(dòng)，然后通過臺(tái)式離心機(jī)離心分離，取上清液備用。 看了以上的操作方法，你還可以自己試驗(yàn)一下，或者上海旦鼎貿(mào)易有限公司。： 我們將專業(yè)為您選購(gòu)適合實(shí)驗(yàn)的離心機(jī)。
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