化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
采集補(bǔ)體因子標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意哪幾點(diǎn)？
閱讀：2687 發(fā)布時(shí)間：2016-9-101. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑. 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染.
2. 加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 "預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影 響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性.一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在 10 分 鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣.
3. 孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài)；同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度.
4. 洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù).
5. 試劑配制：Detection A 及 Detection B 在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或 瓶蓋的液體沉積到管底.標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)溶液 A 工作液，檢測(cè)溶液 B 工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量 配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆.
請(qǐng)配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液 A 時(shí)，一次不要小于 10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃 度誤差；請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)溶液 A 工作液或檢測(cè)溶液 B 工作液.
6. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔 10 分鐘)，如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù).
7. 底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù).