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MALDI-TOF——微生物鑒定方法中的一種質譜方法

閱讀:3526      發(fā)布時間:2021-10-25
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微生物鑒定方法多種多樣。如常使用的形態(tài)觀察、 鏡檢、 重要的生化反應,還有度較高的基因鑒定法。其中,MALDI-TOF方法(基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜),是利用對核糖體蛋白檢測及與標準圖庫比對的一種質譜方法。

該方法檢驗原理是:

微生物中分子量在2000-20000Da范圍內的核糖體蛋白質,其表達基本不受培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、滅活方式以及生長周期等的影響,屬于保守表達的蛋白質,不同種的微生物(甚至亞種)其保守蛋白會有差異,因此每種微生物有其*的蛋白質指紋圖譜(PMF);通過MALDI-TOF測得的微生物蛋白質指紋圖譜,再與標準庫里的指紋圖譜進行匹配、對比,從而完成對微生物快速的鑒定。


除了微生物鑒定外,MALDI-TOF技術還可應用于多種領域,范圍極廣:

1、可疑菌溯源性分析:在檢測出未知菌時,可自建菌庫,保留菌株圖譜信息,有助日后可疑菌的溯源分析。

2、腫瘤篩查中的運用:利用弱陽離子磁珠聯(lián)合MALDI-TOF-MS分析腫瘤患者和健康對照血清蛋白質表達譜,鑒定差異表達蛋白,建立疾病診斷模型,探索該疾病的發(fā)病機制。

3、細菌耐藥性分析:MALDI-TOF MS檢測細菌耐藥性的方法主要分為 3 類: 檢測耐藥菌株的特征性質譜峰、細菌酶活性作用下抗菌藥物的改變和抗菌藥物存在下細菌生長情況。

 

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