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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 已驗(yàn)證siRNA
已證明敲除效率的siRNA:
在預(yù)設(shè)計(jì)siRNA產(chǎn)品中,用熒光定量PCR方法進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)際沉默率
每個(gè)靶基因可提供2條已驗(yàn)證的siRNA
提供實(shí)時(shí)定量PCR引物,可以用SYBR Green熒光染料進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)敲除效率
當(dāng)病毒基因、人工轉(zhuǎn)入基因、轉(zhuǎn)座子等外源性基因隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞基因組內(nèi),并利用宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄時(shí),宿主細(xì)胞常產(chǎn)生一些dsRNA。宿主細(xì)胞胞質(zhì)中的核酸內(nèi)切酶Dicer將dsRNA切割成多個(gè)具有特定長(zhǎng)度和結(jié)構(gòu)的小片段RNA(大約21~23 bp),即siRNA。siRNA在細(xì)胞內(nèi)RNA解旋酶的作用下解鏈成正義鏈和反義鏈,繼之由反義siRNA再與體內(nèi)一些酶(包括內(nèi)切酶、外切酶、解旋酶等)結(jié)合形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。RISC與外源性基因表達(dá)的mRNA的同源區(qū)進(jìn)行特異性結(jié)合,RISC具有核酸酶的功能,在結(jié)合部位切割mRNA,切割位點(diǎn)即是與siRNA中反義鏈互補(bǔ)結(jié)合的兩端。被切割后的斷裂mRNA隨即降解,從而誘發(fā)宿主細(xì)胞針對(duì)這些mRNA的降解反應(yīng)。在正常生物體內(nèi),RNA干擾起到抗病毒、抑制基因過(guò)量表達(dá)的作用。
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