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通過與mRNAs在特異位點的結合,切割靶位點或抑制轉錄(翻譯),MicroRNAs可調控基因表達。MiRNA與靶的相互作用是由RNA誘導的沉默復合體(RISC)介導的。RISC介導的成熟miRNA與位點相互作用依賴于miRNA和靶位點的序列互補性以及在3 ' UTR結合位點的總數(shù)量。 許多重要的調節(jié)基因受miRNAs調控,如Ers受let-7,Bcl-2受miR15和miR16,ERs 受miR206,TPM1受miR-21和PTEN受miR-19a調控?;诩毎治龇椒ǖ臒晒馑孛笀蟾孑d體常用于監(jiān)測受miRNAs調控的基因。
A. 優(yōu)點:
功能性檢測——是一種功能性的分析方法,用于監(jiān)測細胞內miRNA介導的靶基因的調控
可定量分析——miRNAs介導的調控可以通過熒光素酶基因的表達進行定量監(jiān)測
可構建穩(wěn)定細胞系——載體可用于構建表達報告基因的穩(wěn)定細胞系
B. 原理:
pLuc-3UTR報告載體是一系列基于熒光素酶報告的構建體,用于監(jiān)測miRNA介導的細胞內靶基因調控。每個載體含有CMV啟動子、熒光素酶基因、3 ' UTR 靶基因和SV40終止子序列。MiRNA的表達并與3 ' UTR結合,導致熒光素酶基因表達的抑制。因此miRNA介導的特異靶的調控可通過熒光素酶活性進行監(jiān)測。比較二個樣本熒光素酶活性,可解析調控,明確差異。
產品名稱 | 規(guī)格 | 編號 |
miRNA靶基因熒光素酶報告載體系列 | 2ug | LR-1001 |
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