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293A 人胚腎細(xì)胞系.
培養(yǎng)條件： | *培養(yǎng)基：90%DMEM/F12（內(nèi)含2mM L-glutamine）+10%胎牛血清 培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5% | |
傳代方法： | 293A 人胚腎細(xì)胞系. 收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。 （一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。 (二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下： 1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。 2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。 3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。 注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造 成生長不好。 | |
凍存方法： |
凍存液：95%*培養(yǎng)液，5%DMSO 儲存：液氮儲存 | |
