3D超景深顯微鏡能夠清晰地觀察到傳統(tǒng)光學顯微鏡因景深限制而無法看清的樣品細節(jié),一次性獲取更大范圍內的樣品信息,無需頻繁調整焦距,提高了觀察和分析的效率。不僅可以獲得樣品表面的二維圖像,還能呈現(xiàn)出樣品的三維結構信息,讓用戶能夠從不同角度觀察和分析樣品的立體形態(tài)、高度分布、體積等特征,對于研究樣品的微觀結構和空間關系具有重要意義??山Y合斜照明、透射光和偏振光等多種照明方式,根據(jù)不同的樣品特性和觀察需求選擇合適的照明模式,以獲得更清晰、對比度更高的圖像,更好地展現(xiàn)樣品的細節(jié)和特征。
3D超景深顯微鏡的測定步驟:
1.樣品準備:確保樣品表面平整、清潔,無灰塵、油污等雜質。對于不透明的樣品,可能需要進行適當?shù)那懈睢⒋蚰セ驋伖馓幚?,以獲得清晰的觀察表面;對于透明的樣品,可根據(jù)實際情況選擇合適的載玻片或培養(yǎng)皿進行固定。
2.設備開啟與預熱:打開顯微鏡的電源開關,等待設備預熱一段時間,一般約為15-30分鐘,使光源和光學系統(tǒng)達到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。部分顯微鏡可能還需要啟動連接的計算機及相關軟件。
3.放置樣品:將準備好的樣品放置在顯微鏡的載物臺上,并使用夾具或樣品固定裝置將其牢固地固定,防止在觀察過程中樣品發(fā)生移動。根據(jù)樣品的大小和觀察需求,調整載物臺的位置,使樣品大致位于視場中心。
4.初步觀察與對焦:通過目鏡或連接的顯示器觀察樣品,使用粗動調焦手輪或旋鈕,將載物臺緩慢上下移動,直至看到樣品的大致輪廓。然后,再使用細動調焦手輪或旋鈕,對樣品進行準確對焦,使觀察到的圖像清晰銳利。
5.數(shù)據(jù)采集:一旦完成對焦,即可開始采集數(shù)據(jù)。根據(jù)顯微鏡的類型和設置,可以選擇不同的采集模式,如單張圖像采集、連續(xù)多幀采集或視頻采集等。在采集過程中,確保顯微鏡的光照強度、曝光時間等參數(shù)設置合適,以獲得高質量的圖像。
6.三維重建:采集到的一系列二維圖像數(shù)據(jù)將被傳輸?shù)接嬎銠C中,通過專業(yè)的圖像處理軟件進行三維重建。軟件會根據(jù)圖像之間的視差信息和深度線索,計算出樣品的三維結構和表面形貌,生成三維圖像或模型。
7.結果分析與測量:對生成的三維圖像或模型進行觀察和分析,可以使用軟件提供的測量工具,對樣品的各種參數(shù)進行測量,如高度、深度、寬度、體積、表面積等。同時,還可以對樣品的表面紋理、形狀特征等進行詳細的研究和分析。
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