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北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司
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采用PCR或等溫?cái)U(kuò)增的方法來擴(kuò)增DNA（或RNA）時(shí)，反應(yīng)溫度在50℃以上，反應(yīng)體積介于10-100 ul之間，并且可能需要在樣品上覆蓋一層油性物質(zhì)或采取相似的封閉操作。這是因?yàn)椋诜磻?yīng)的過程中伴隨的蒸發(fā)現(xiàn)象致使反應(yīng)體積不可過小，另一方面，較大的反應(yīng)體積會(huì)消耗更多的耗材，并且在循環(huán)擴(kuò)增過程中無法有效的進(jìn)行溫度控制（達(dá)到預(yù)定的溫度需要較長的時(shí)間）。TwistDx’s提出的重組酶聚合酶擴(kuò)增（RPA）技術(shù)對(duì)這一難題給出了解決方案。重組酶聚合酶擴(kuò)增反應(yīng)可在低溫（通常在37-42℃，可以在更低溫度下進(jìn)行）下進(jìn)行，反應(yīng)迅速，用時(shí)短（通常在3-15 min完成反應(yīng)），即便不在反應(yīng)體系上覆蓋油層或采取其它的密封措施仍可大大降低蒸發(fā)造成的影響。低溫運(yùn)行，可有效防止背景噪聲，使結(jié)果更，即便需要更長的時(shí)間達(dá)到*反應(yīng)溫度也不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，RPA技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于，既可用于微體積反應(yīng)（數(shù)字方法），也可用于大體積反應(yīng)體系，例如具有簡單生物樣本的低復(fù)雜性分子檢測。文中展示了RPA技術(shù)用于不同體積反應(yīng)體系的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，反應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)的PCR管（0.2 ml）中進(jìn)行，各反應(yīng)體系均未采取油密封或其它密封操作。
原文：
Recombinase Polymerase Amplification (RPA) an isothermal technique suitable for a range of applications- Evaluation of RPA volume tolerance. BioTechniques 62:190 (April 2017).
