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技術(shù)文章

上海恒遠(yuǎn)與您分享ELISA檢測中涉及的計算公式

閱讀:3569          發(fā)布時間:2017-5-11

    酶標(biāo)板在酶聯(lián)免疫吸附實驗中,參與免疫學(xué)反應(yīng)的抗原、抗體、標(biāo)記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應(yīng)溫度、時間等條件起著關(guān)鍵作用。包被酶標(biāo)版所用的抗體量,我們是可以用公式計算出來的。公式:V=5n/a(單位:ul),a:抗體濃度,n:酶標(biāo)板數(shù)量。

    做ELISA實驗時,大家都知道樣本要進(jìn)行一定比例的濃度稀釋,且稀釋太低或太高都會導(dǎo)致線性關(guān)系就不理想,結(jié)果也就不準(zhǔn)了。那么,如何從標(biāo)準(zhǔn)曲線中通過樣本的吸光度計算樣本中的蛋白含量?方法很簡單,只需三步驟,輕輕松松搞定。
1 設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)品,以不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)建立坐標(biāo)系,求出曲線方程y=ax+b,
2 得出回歸方程 x=(y-b)/a 
3 所得樣品吸光度代入方程即可取得所檢測的濃度

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