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技術(shù)文章

上海恒遠(yuǎn)為您分享:如何確定抗體的Z佳稀釋度比例

閱讀:3086          發(fā)布時間:2017-8-10

    大家在稀釋抗體的時候,有的抗體說明書中有推薦稀釋比例就按照該比例稀釋進行實驗,但是有的抗體說明書沒有推薦稀釋比例,那么我們就需要做大量的預(yù)實驗來摸索*的比例了。

    一般來說,抗體說明書都會提供一個稀釋度范圍,但是,有些公司生產(chǎn)的抗體,其說明書上沒有提供抗體稀釋度。這是可以理解的,因為如果說明書上標(biāo)明的抗體稀釋度如果高的話,就說明這種抗體效價不高,質(zhì)量不好。為此,實驗者可以先在網(wǎng)上搜索一些相關(guān)的文獻,文獻的方法與材料中一般會把抗體來源以及稀釋度都詳細(xì)的標(biāo)出的。但真正做實驗時,還是要根據(jù)自己實驗樣品的情況和檢測指標(biāo)表達的豐富程度等因素先摸索一下抗體的稀釋度的。

    所以在做預(yù)實驗時,就采用倍比稀釋法,先做一個梯度,比如1:100,1:200,1:400,1:800,1:1600. 看看在這幾個梯度范圍內(nèi),樣品中的目的蛋白的表達情況,然后再從中確定你認(rèn)為的稀釋度進行正式實驗,這樣做比較好一些。由于標(biāo)本類型、實驗條件、操作環(huán)境等各種因素的影響,推薦濃度僅作為參考。

一抗稀釋液一般為PBS/0.4% Triton X-100/1%BSA。

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