国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當(dāng)前位置:
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司>技術(shù)文章>細(xì)胞凋亡晚期檢測技術(shù)

技術(shù)文章

細(xì)胞凋亡晚期檢測技術(shù)

閱讀:1088          發(fā)布時間:2021-1-19

     晚期檢測:

    細(xì)胞凋亡晚期中,核酸內(nèi)切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產(chǎn)生大量長度在180-200 bp 。對于這一現(xiàn)象的檢測通常有以下兩種方法:
 
    1.TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling)
 
    通過DNA末端轉(zhuǎn)移酶將帶標(biāo)記的 dNTP (多為dUTP)間接或直接接到3’-OH端,再通過酶聯(lián)顯色或熒光檢測定量分析結(jié)果。美國Intergen公司提供多種標(biāo)記方法,直接熒光標(biāo)記,介導(dǎo)熒光標(biāo)記或過氧化物酶聯(lián)顯色,可做細(xì)胞懸液、福爾馬林固定或石蠟處理的組織、細(xì)胞培養(yǎng)物等多種樣本的檢測。其中,直接標(biāo)記步驟少,操作簡便。而間接標(biāo)記有信號放大的作用,檢測靈敏度高。
 
    2.LM-PCR Ladder (連接介導(dǎo)的PCR檢測)
 
    當(dāng)?shù)蛲黾?xì)胞比例較小以及檢測樣品量很少(如活體組織切片)時,直接瓊脂糖電泳可能觀察不到核DNA的變化。CLONTECH公司的ApoAlert?LM-PCR Ladder Assay Kit通過LM-PCR(ligation-mediated PCR),連上特異性接頭,專一性地擴(kuò)增核小體的梯度片段,從而靈敏地檢測凋亡時產(chǎn)生的核小體的梯度片段。此外,LM-PCR 檢測是半定量的,因此相同凋亡程度的不同樣品可進(jìn)行比較。
 
    上述兩種方法都針對細(xì)胞凋亡晚期核DNA斷裂這一特征,但細(xì)胞受到其它損傷(如機(jī)械損傷,紫外線等)也會產(chǎn)生這一現(xiàn)象,因此它對細(xì)胞凋亡的檢測會受到其它原因的干擾。
 
    3.emerase Detection (端粒酶檢測)
 
    這是相對來說推出較早,用得較多的一種方法。端粒酶是由RNA和蛋白組成的核蛋白,它可以自身RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成端粒區(qū)重復(fù)序列,使細(xì)胞獲得“永生化"。正常體細(xì)胞是沒有端粒酶活性的,每分裂一次,染色體的端粒會縮短,這可能作為有絲分裂的一種時鐘,表明細(xì)胞年齡、復(fù)制衰老或細(xì)胞凋亡的信號。研究發(fā)現(xiàn),90%以上的癌細(xì)胞或凋亡細(xì)胞都具有端粒酶的活性。Intergen公司的TRAP-eze emerase Detection Kit在1996年推出。它提供特定的寡核苷酸底物,分別與底物及端粒重復(fù)序列配對的引物。如果待測樣本中含有端粒酶活性,就能在底物上接上不同個數(shù)的6堿基(GGTTAG)端粒重復(fù)序列,通過PCR反應(yīng),產(chǎn)物電泳檢測就可觀察到相差六個堿基的DNA Ladder現(xiàn)象(參見圖4)。此外,Intergen公司還提供用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測的試劑盒.
 
    同樣,這種檢測方法也不專對細(xì)胞凋亡,檢測結(jié)果也不純反應(yīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~

對比框

產(chǎn)品對比 產(chǎn)品對比 聯(lián)系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機(jī)商鋪
在線留言
南城县| 青州市| 马边| 界首市| 宾阳县| 醴陵市| 台山市| 宁国市| 广宗县| 大邑县| 年辖:市辖区| 株洲市| 陵川县| 益阳市| 九江县| 理塘县| 绩溪县| 宝兴县| 本溪| 元朗区| 新建县| 聂拉木县| 曲周县| 中阳县| 汾阳市| 临夏市| 大名县| 曲松县| 项城市| 沅陵县| 颍上县| 锡林浩特市| 济南市| 宜春市| 亳州市| 同仁县| 浦城县| 台中市| 定远县| 会理县| 台州市|