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技術(shù)文章

您的ELISA試劑盒實驗為什么會失敗?

閱讀:1203          發(fā)布時間:2021-2-19
成功的實驗是一個循序漸進的過程,影響ELISA實驗結(jié)果的因素有很多,只有一一的掌握了實驗的細節(jié),才能購做出完美的實驗。您可知您的ELISA試劑盒實驗為什么會失???今天文章的內(nèi)容中,小編將為您找找其中的原因。
 
第yi、標本的影響
    溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性??赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺可溶性的有色物質(zhì),即顯藍色,產(chǎn)生假陽性。所以嚴重溶血標本禁用。
 
第二、標本受細菌污染
    因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
 
第三、標本保存不當
    在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5d內(nèi)測定的血清標本可存放于4
℃,1周后測定的血清標本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。
 
第四、標本凝固不全
    在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。 
 
 
  上海恒遠生物秉承“信譽、質(zhì)量、品牌、誠信為本"的理念,以優(yōu)良的服務(wù)質(zhì)量和實惠的價格,來回饋每一位客戶。ELISA試劑盒實驗前,請仔細閱讀中英文說明書,我們提供免費代測,實驗過程指導(dǎo)服務(wù),詳情咨詢上海恒遠生物在線客服。

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