国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當(dāng)前位置:
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司>技術(shù)文章>恒遠(yuǎn)生物|免疫熒光技術(shù)的基本原理

技術(shù)文章

恒遠(yuǎn)生物|免疫熒光技術(shù)的基本原理

閱讀:771          發(fā)布時(shí)間:2023-10-17

免疫熒光技術(shù)又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展zui早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。


該技術(shù)的主要特點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。

主要缺點(diǎn)是:非特異性染色問題尚未完quan解決,結(jié)果判定的客觀性不足,技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。


一、原理


免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí),只要知道其中的一個(gè)因素,就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。


直接法:將標(biāo)記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標(biāo)本上,經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色,用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體,室溫下干燥后封片、鏡檢。


間接法:如檢查未知抗原,先用已知未標(biāo)記的特異抗體(第一抗體)與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng),用水洗去未反應(yīng)的抗體,再用標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)與抗原標(biāo)本反應(yīng),使之形成抗原—抗體—抗體復(fù)合物,再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體,干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體,則表明抗原標(biāo)本是已知的,待檢血清為第一抗體,其它步驟的抗原檢查相同。標(biāo)記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性,如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發(fā)生反應(yīng),因此,制備標(biāo)記抗體適用于雞任何抗原的診斷。


二、技術(shù)分類:


1.熒光抗體技術(shù)(熒光顯微鏡技術(shù))


抗原抗體反應(yīng)后,利用熒光顯微鏡判定結(jié)果的檢測方法。


2.免疫熒光測定技術(shù):


抗原抗體反應(yīng)后,利用特殊儀器測定熒光強(qiáng)度而推算被測物濃度的檢測方法。


1)熒光物質(zhì)


熒光色素


許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機(jī)化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。


常用的熒光色素:


(1)異硫氰酸熒光素為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末,易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,zui大吸收光波長為490495nm,zui大發(fā)射光波長520530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光有兩種同分異結(jié)構(gòu),其中異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性、與蛋白質(zhì)結(jié)合能力等方面都geng好,在冷暗干燥處可保存多年,是應(yīng)用zui廣泛的熒光素。


其主要優(yōu)點(diǎn)是:


①人眼對黃綠色較為敏感


②通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。


(2)四乙基羅丹明為橘紅色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙-酮。性質(zhì)穩(wěn)定,可長期保存。zui大吸收光波長為570nm,zui大發(fā)射光波長為595-600nm,呈橘紅色熒光。


(3)四甲基異硫氰酸羅丹明,zui大吸引光波長為550nm,zui大發(fā)射光波長為620nm,呈橙紅色熒光。與FITC的翠綠色熒光對比鮮明,可配合用于雙重標(biāo)記或?qū)Ρ热旧F洚惲蚯杌膳c蛋白質(zhì)結(jié)合,但熒光效率較低。


常見熒光素的特性:


1)FITC:黃色結(jié)晶粉末,吸收光:490~495nm,發(fā)射光:520~530nm,明亮的黃綠色熒光。


2)RB200: 橘紅色粉末, 吸收光570nm,發(fā)射光 595~600nm,橘紅色熒光。


3)TRITC: 紫紅色粉末,吸收550nm,發(fā)射光 620nm,橙紅色熒光。


4)鑭系:Eu3+、Tb3+


5)PE:吸收光490~560nm,發(fā)射光 595nm,紅色熒光。


6)其它:酶作用后產(chǎn)生熒光物質(zhì)。

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對比框

產(chǎn)品對比 產(chǎn)品對比 聯(lián)系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機(jī)商鋪
在線留言
毕节市| 岚皋县| 缙云县| 青河县| 拜泉县| 迁西县| 久治县| 江北区| 方正县| 花莲市| 南华县| 大连市| 屯昌县| 武冈市| 新昌县| 竹北市| 武平县| 通城县| 内丘县| 富阳市| 安宁市| 景宁| 卢湾区| 柘荣县| 潞西市| 柳江县| 儋州市| 衡东县| 石城县| 大安市| 正蓝旗| 澎湖县| 晴隆县| 景德镇市| 达拉特旗| 景洪市| 海林市| 乐都县| 金溪县| 盐津县| 张北县|