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酶聯(lián)免疫檢測樣本這樣處理一步到位！
閱讀：1228 發(fā)布時(shí)間：2015-5-19[前言] 上海恒遠(yuǎn)公司多次強(qiáng)調(diào)過，在收集樣本前都必須有一個完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定，并且注意避免反復(fù)凍融。在酶聯(lián)免疫試劑盒檢測實(shí)驗(yàn)前，樣本的處理與保存時(shí)影響整個實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)因素之一。今天小編為大家介紹一些相關(guān)小技巧，酶聯(lián)免疫檢測樣本這樣處理一步到位！
一、血清
對于血清樣本的處理，都是離心取上清液待檢，在做預(yù)實(shí)驗(yàn)過程中，血清樣本稀釋5倍直接進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
二、血漿
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
三、尿液
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
四、糞便樣本的處理方法
對于糞便樣本的處理，一般要求采集干的糞便，稀的糞便不利于檢測(對樣本處理帶來難度，也會使準(zhǔn)確性降低)。
糞便樣本處理如下：
① 收集：直接用醫(yī)院臨床收集糞便的耗材進(jìn)行收集；
② 采樣：一般選取的重量不能低于50mg，以1g為基準(zhǔn)。稱取1g加9ml的PBS(磷酸鹽緩沖液，PH控制在7.2-7.4，濃度為0.01mol/L)換算成勻漿的比例就是10%；
③ 保存：勻漿后的樣本如果采樣周期在1周之內(nèi)，可以保存在2-8℃，如果取樣周期在一個禮拜以上一個月以內(nèi)，-20℃保存。如果取樣周期超過1個月，保存在-80冰箱！低溫保存的話，盡量避免反復(fù)凍融。
五、組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
植物組織的提取，不管是根莖組織還是葉片組織還是果實(shí)組織，都應(yīng)該采用鮮重的計(jì)重方式，一般要遵循以下原則：
① 稱取的組織重量不能低于50mg。
② 勻漿的比例按照10%，即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液一般選取PBS(PH=7.2-7.4)
③ 組織在勻漿器勻漿過程中，勻漿液應(yīng)該分2次加進(jìn)去，這樣勻漿更充分。
④ 充分勻漿完成后離心取上清，離心機(jī)的轉(zhuǎn)數(shù)選取2000-3000轉(zhuǎn)每分，轉(zhuǎn)數(shù)不宜超過5000.離心時(shí)間為15-30分鐘。
六、細(xì)胞培養(yǎng)上清
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
酶聯(lián)免疫試劑盒可檢測的液體類標(biāo)本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。以上內(nèi)容，上海恒遠(yuǎn)公司為大家介紹的是一些常見樣本的處理。了解更多相關(guān)資訊，可我司業(yè)務(wù)員。我公司試劑盒產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研使用，提供免費(fèi)代檢測服務(wù)。