您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品分類品牌分類
-
混勻儀|混合器 氣體發(fā)生器 分光測色計 勻漿機(jī) 研磨機(jī) 超凈工作臺 洗板機(jī) 高低溫試驗(yàn)箱 恒溫金屬浴 電阻爐 溶劑過濾器 漩渦混合儀|旋渦混勻儀 均質(zhì)器 水槽 恒溫水槽 手套 培養(yǎng)板 生物安全柜 天平 滴定管 瓶口分液器 光澤儀 錐入度儀 濁度計 分析儀 冷藏保存箱 色差儀 超純水機(jī) 預(yù)制冷槽 油浴槽 冷卻水循環(huán)裝置 溶媒回收裝置 恒溫水浴槽 液氮罐 馬弗爐 酶標(biāo)儀 培養(yǎng)箱 電泳儀 潔凈工作臺 干燥箱 磁力攪拌器 滅菌器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 低溫冰箱 防爆冰箱 離心機(jī) 振蕩器 移液器 真空泵
熒光成像與生物發(fā)光成像技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)對比
上次，我們對比了熒光成像和生物發(fā)光的基本原理。那針對自己的課題，生物發(fā)光和熒光成像哪個好？什么情況下選擇生物發(fā)光，什么情況下選擇熒光成像？今天為大家解答關(guān)鍵問題：熒光成像和生物發(fā)光成像的優(yōu)缺點(diǎn)是什么？
一、熒光成像技術(shù)優(yōu)點(diǎn)
數(shù)據(jù)來源：使用FOBI整體熒光成像系統(tǒng)對熒光染料Cy5標(biāo)記的藥物進(jìn)行觀察
相比生物發(fā)光成像，熒光成像技術(shù)的優(yōu)勢主要表現(xiàn)在：
1 熒光蛋白及熒光染料標(biāo)記能力更強(qiáng)
熒光標(biāo)記分子種類繁多，包括熒光蛋白、熒光染料、量子點(diǎn)標(biāo)記等，可以對基因、蛋白、抗體、化合藥物等進(jìn)行標(biāo)記。應(yīng)用范圍極廣，可以對樣本進(jìn)行多色標(biāo)記，一個樣本同時獲得多種細(xì)胞或藥物的分布。
2 信號強(qiáng)度高
熒光成像的光子強(qiáng)度較生物發(fā)光更強(qiáng)，持續(xù)時間長，對CCD的靈敏度要求相對較低，無需必配低溫冷CCD，即可獲得清晰成像結(jié)果。
3 實(shí)驗(yàn)成本低，成像過程簡單
相比生物發(fā)光成像，成像前無需注射熒光素酶底物。有合適的激發(fā)光源照射，就可發(fā)出特定波長的發(fā)射光。只要熒光基團(tuán)穩(wěn)定，就可實(shí)現(xiàn)隨時激發(fā)、發(fā)光、檢測。
4從活體到離體均可成像
相比生物發(fā)光只能在活細(xì)胞內(nèi)才會發(fā)光。熒光蛋白或熒光染料只需保持熒光基團(tuán)穩(wěn)定即可穩(wěn)定發(fā)光，并可在活體或離體組織器官進(jìn)行觀察。在實(shí)驗(yàn)前期熒光材料制備階段，可以直接在EP管中進(jìn)行成像觀察。
二、生物發(fā)光技術(shù)優(yōu)點(diǎn)
數(shù)據(jù)來源：Yichi Su. et al. Nature Methods volume 17, 852–860 (2020)
相比熒光成像，生物發(fā)光成像的主要優(yōu)勢表現(xiàn)在：
1特異性強(qiáng)，無自發(fā)熒光
以熒光素酶作為體內(nèi)報告源的生物發(fā)光方法，特異性*。由于動物本身沒有任何自發(fā)光，生物發(fā)光具有極低的背景和*的信噪比。
2高靈敏度
生物體內(nèi)很多物質(zhì)在激發(fā)光的照射下，也會發(fā)出熒光，這些非特異性熒光背景會影響檢測靈敏度。熒光成像的靈敏度可在動物體內(nèi)檢測到約104細(xì)胞，而生物發(fā)光具有在動物體內(nèi)監(jiān)測102數(shù)量級細(xì)胞的靈敏度。
3檢測深度更高
對于需要在深部組織進(jìn)行的研究（檢測深度在3~4cm），應(yīng)用生物發(fā)光是選擇。
4定量性
由于熒光素酶基因是插入細(xì)胞染色體中穩(wěn)定表達(dá)的，單位細(xì)胞的發(fā)光數(shù)量、發(fā)光條件相對穩(wěn)定。即使標(biāo)記細(xì)胞在動物體內(nèi)有復(fù)雜的定位，亦可從動物體表的信號水平測量出發(fā)光細(xì)胞的相對數(shù)量。
總結(jié)
???????
熒光成像和生物發(fā)光技術(shù)，互為補(bǔ)充，分別滿足不同的研究領(lǐng)域。對于不同的研究，可根據(jù)兩者的特性及實(shí)驗(yàn)要求選擇。例如在腫瘤生長與轉(zhuǎn)移、藥物的分布與代謝、納米顆粒的靶向性與代謝、植物基因的表達(dá)、生物相容性材料開發(fā)、新型標(biāo)記技術(shù)的開發(fā)等多個研究中均可用到熒光成像技術(shù)