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上海巴玖 談如何選擇倒置顯微鏡與熒光顯微鏡

閱讀:1706        發(fā)布時間:2021-1-10

在細胞培養(yǎng)及相關衍生實驗中,顯微鏡是一個很重要的儀器。目前,市場上有各種類型的顯微鏡,選擇一款符合需求又適用的顯微鏡是一個挑戰(zhàn),下面為大家介紹倒置顯微鏡和熒光顯微鏡的原理,便于大家選擇。

倒置顯微鏡組成和普通顯微鏡一樣,主要包括三部分:機械部分、照明部分、光學部分。 倒置顯微鏡組成和普通正置顯微鏡一樣,只不過物鏡與照明系統(tǒng)顛倒,前者在載物臺之下,后者在載物臺之上。 這樣的構造使得照明聚光系統(tǒng)與載物臺的有效距離可以顯著擴大,便于放置培養(yǎng)皿、細胞培養(yǎng)瓶等較厚的待觀察器具(當然載玻片等也可以),而同時物鏡與材料之間的工作距離不必很大。 倒置顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細胞、細菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細胞、細菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過程,并可將此過程中的任一形態(tài)拍攝下來。 在細胞學、寄生蟲學、腫瘤學、免疫學、遺傳工程學、工業(yè)微生物學、植物學等領域中應用廣泛。

倒置顯微鏡

熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。 對被檢物體來說,熒光產生方式有兩種:自發(fā)熒光,經過紫外照射直接發(fā)出熒光;繼發(fā)熒光,被觀察物體經過熒光染料處理之后,經過紫外光照射才能發(fā)出熒光。 細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后產生自發(fā)熒光;另有一些物質本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發(fā)出繼發(fā)熒光。 熒光顯微鏡利用一個高發(fā)光效率的點光源,經過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(紫外光365nm或紫藍光420nm)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內的熒光物質發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。 這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結構和功能以及化學成分等的研究。

倒置顯微鏡熒光顯微鏡分為透射式和落射式兩類,前者較為原始,后者較為*。 兩類熒光顯微鏡的基本構建相似,主要區(qū)別為:透射式的激發(fā)光透過標本,標本整體產生熒光,熒光再進入物鏡,放大倍數越高,熒光越弱;落射式的激發(fā)光投射在標本表面,標本表面產生熒光,熒光再進入物鏡,放大倍數越高,熒光越強,適于進行高倍觀察。 熒光顯微鏡主要構件有汞燈光源、激發(fā)濾板、分色鏡(落射式)、壓制濾板、暗場聚光鏡(透射式)等。此外,由于汞燈發(fā)熱嚴重,大多還裝有吸熱濾鏡。 部分熒光顯微鏡還有相差物鏡和環(huán)狀光闌,因此可以進行相差觀察。 還有的熒光顯微鏡采取倒置構架,又是倒置顯微鏡,等等。

倒置顯微鏡

此外,上述顯微鏡都可以通過安裝CCD組裝成數碼顯微鏡,它是將顯微鏡看到的實物圖像通過數模轉換,使其成像在計算機上。 從而,我們可以對微觀領域的研究從傳統(tǒng)的普通的雙眼觀察到通過顯示器上再現,從而提高了工作效率。

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