国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

| 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

行業(yè)產(chǎn)品

當(dāng)前位置:
迪圖(上海)生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>上海巴玖講解PCE反應(yīng)有那些要素流程

產(chǎn)品分類品牌分類

更多分類

上海巴玖講解PCE反應(yīng)有那些要素流程

閱讀:1422        發(fā)布時間:2021-1-11

PCE反應(yīng)有那些要素流程

接下來介紹PCE反應(yīng)有那些要素流程說明.
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
二維碼 意見反饋
在線留言
页游| 嫩江县| 同心县| 文昌市| 大冶市| 平度市| 兴义市| 九龙坡区| 玛曲县| 夏津县| 隆德县| 龙江县| 腾冲县| 德州市| 红桥区| 衡阳县| 民乐县| 准格尔旗| 雷州市| 晴隆县| 万山特区| 尖扎县| 安多县| 英吉沙县| 任丘市| 建阳市| 双鸭山市| 苏州市| 岱山县| 集安市| 日照市| 灌南县| 双辽市| 林甸县| 黔东| 莱芜市| 昂仁县| 公安县| 葵青区| 东台市| 班戈县|