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PCR技術(shù)的發(fā)展及其與離心機(jī)?的關(guān)聯(lián)
從20世紀(jì)80年代中期開始，聚合酶鏈反應(yīng)（Polym erase Chain Reac tion，PCR）發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。
因?yàn)閮?yōu)點(diǎn)眾多又突出，比如特異﹑敏感、產(chǎn)率高﹑快速﹑簡便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等，所以那時(shí)候被稱為醫(yī)學(xué)生物領(lǐng)域的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
查閱相關(guān)資料獲悉人類對核酸的研究有100多年的歷史了,從20世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)。
K orana于1971年最早提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想,該設(shè)想在1985年被Mullis等人實(shí)現(xiàn)。他們發(fā)明了具有劃時(shí)代意義的聚合酶鏈反應(yīng)。其原理類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制,只是在試管中給 DNA的體外合成提供了合適的條件:模板DNA,寡核苷酸引物, DNA聚合酶,合適的緩沖體系，DNA變性、復(fù)性及延伸的溫度與時(shí)間等。
但Mullis最初使用的DNA聚合酶是Klenw酶,它不耐高溫，90℃時(shí)會變性失活,每次循環(huán)都要重新添加同時(shí)其體外擴(kuò)增的保真性較差，使得 PCR技術(shù)在一段時(shí)間內(nèi)沒能引起生物醫(yī)學(xué)界的足夠重視。直到1988年,Saiki等人從嗜熱桿菌( hem us aquaticus)中提取到一種耐熱DNA聚合酶(此酶被命名為TaqDNA多聚酶)才使得PCR技術(shù)得以廣泛應(yīng)用。
PCR技術(shù)模擬DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物,該原理主要包括3個(gè)基本反應(yīng)過程:變性一---退火—一--延伸。變性主要是指雙鏈 DNA的變性,即雙鏈 DNA經(jīng)加熱至93℃左右,其熱穩(wěn)定性降低,配對堿基之間的氫鍵斷裂,使雙鏈DNA成為單鏈,以便與引物結(jié)合。退火是指單鏈 DNA在溫度降低時(shí)與引物的復(fù)性(稱為退火)。在此過程中,引物與單鏈 DNA模板仍然按照堿基互補(bǔ)的方式配對。延伸是指引物與DNA模板按堿基互補(bǔ)的原則配對后,在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,進(jìn)行體外的半保留復(fù)制,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的新鏈。
經(jīng)重復(fù)循環(huán)變性—-退火-—--延伸3個(gè)過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈"而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一次循環(huán)需2~4 m in 2~3 h就能將目的基因擴(kuò)增、放大幾百萬倍。
由此可見PCR技術(shù)相當(dāng)復(fù)雜，人們除了推進(jìn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，還在想法設(shè)法的始得實(shí)驗(yàn)技術(shù)更成熟，那么如何才能實(shí)現(xiàn)，答案是借助儀器，每一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)需要的實(shí)驗(yàn)儀器需要更精確更適合這樣才能更進(jìn)一步的提升實(shí)驗(yàn)效率。
比如核酸檢測就需要用到核酸檢測離心機(jī)。
通過專業(yè)離心機(jī)廠家上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司我們可以了解到：
核酸檢測是在PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，核酸是生物體內(nèi)的高分子化合物，包括脫氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA兩大類，廣泛存在于所有動(dòng)植物、微生物及生物體內(nèi)。核酸是基本的遺傳物質(zhì)，在生長、遺傳、變異等一系列重大生命現(xiàn)象中起決定性的作用。通過核酸檢測離心機(jī)的檢測，對腫瘤的發(fā)生，病毒的感染以及射線對人體的影響等都有重要的臨床意義。