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全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在單細(xì)胞測序中的應(yīng)用
細(xì)胞計(jì)數(shù)采用的方法？
傳統(tǒng)方法：臺盼藍(lán)染色法
臺盼藍(lán)染色是對死活細(xì)胞進(jìn)行分別計(jì)數(shù)的方法之一，染色原理是臺盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色；而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜損傷，染料透過細(xì)胞膜在細(xì)胞內(nèi)富集而使細(xì)胞著藍(lán)色。不過，臺盼藍(lán)染色并不一定能準(zhǔn)確分辨有核細(xì)胞和細(xì)胞碎片，因此它往往低估細(xì)胞總數(shù)而高估細(xì)胞活力。
熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)方法
吖啶橙/碘化丙啶（AO/PI）染色原理：活細(xì)胞經(jīng)AO染色發(fā)出綠色熒光，而死細(xì)胞經(jīng)PI染色發(fā)出紅色熒光。重要的是，對背景復(fù)雜的細(xì)胞，比如說外周血單個(gè)核細(xì)胞，含有細(xì)胞碎片較多或成簇的細(xì)胞計(jì)數(shù)，避免了細(xì)胞碎片的檢測。這種方法最近也應(yīng)用在單細(xì)胞基因組學(xué)應(yīng)用上，其中綠色對應(yīng)了完整細(xì)胞，而紅色對應(yīng)了成功分離的細(xì)胞核。這種策略讓研究人員能夠計(jì)算未裂解的殘留細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分比，同時(shí)對細(xì)胞核進(jìn)行計(jì)數(shù)，提示樣本質(zhì)量，幫助研究人員確定是否繼續(xù)進(jìn)行單細(xì)胞基因組學(xué)流程。
全自動(dòng)熒光細(xì)胞分析儀
JSY-FL-045N型熒光細(xì)胞分析儀，明場+雙色熒光通道的結(jié)合使實(shí)驗(yàn)更加簡單快捷，同時(shí)還具備轉(zhuǎn)染檢測功能，更加拓寬了檢測的寬度。檢測細(xì)胞種類更加龐大，不僅適用于單純的培養(yǎng)細(xì)胞，對從組織中、骨髓中、外周血、肺泡中、肝臟中分離出的種類和來源差異較大的細(xì)胞標(biāo)本，也可以快速的計(jì)數(shù)和分析。通過熒光標(biāo)記技術(shù)和圖像分類識別技術(shù)對顯微獲取的熒光數(shù)字圖像自動(dòng)進(jìn)行分析，獲取細(xì)胞的死活狀態(tài)、凋亡情況以及實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分類。