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淺談幾點(diǎn)紫外檢測(cè)儀使用說(shuō)明
迪圖(上海)生物科技有限公司 淺談紫外檢測(cè)儀概述:
紫外檢測(cè)儀是液相色譜中的一種紫外裝置,儀器配上層析柱,恒流泵,部分收集器等,即組成一完整的液相色譜分離分析裝置,它是從現(xiàn)代生物學(xué)研究,藥物測(cè)定、農(nóng)業(yè)科研、化工、食品及醫(yī)療單位對(duì)具有紫外吸收的樣品的作定量分析,本儀器主要元件器采用進(jìn)口,光電培增管IP28型,性能穩(wěn)定、靈敏度高等。
紫外檢測(cè)儀主要技術(shù)指標(biāo):
1、核酸蛋白檢測(cè)儀波長(zhǎng):254nm、280nm
2、紫外檢測(cè)儀波長(zhǎng):220nm、254nm、280nm、340nm
3、樣品池,容積100微升,光程3毫米
4、量程范圍:0-100%T、0-2A、0-1A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A
5、LED數(shù)字顯示
6、儀器可連續(xù)工作一周
7、電源:220VAC±10%50HZ
8、溫度:-5℃~35℃
紫外檢測(cè)儀工作原理:
儀器工作原理的依據(jù)是光吸收定律。從光源發(fā)出的光經(jīng)狹縫、濾光片、樣品池到光電培增管上,使束由于樣品濃度不同所引起光強(qiáng)的變化轉(zhuǎn)換成光電流的變化,此光電流經(jīng)放大器輸入到對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器,使透光率T轉(zhuǎn)成A輸出,即A=1g — =εCL式中ε為待測(cè)樣品的克分子消光系統(tǒng),C為樣品濃度,采用克分子/升單位,L為光程,用厘米作單位。根據(jù)上式就知測(cè)出了A,就知樣品濃度C。若從放大器直接輸入記錄儀,繪出的是樣品透光率T變化的圖譜,若從對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入到記錄儀繪出的是樣品光密度A變化的圖譜。
紫外檢測(cè)儀儀器結(jié)構(gòu):
它由一組光源,四塊干涉濾色片,一塊聚光透鏡,一只樣品池,一只光電倍增管,一塊放大板和一塊對(duì)數(shù)板等組成,面板上有聚乙稀塑料管的進(jìn)樣口和出樣口,A調(diào)零以及調(diào)節(jié)“光量"大小旋鈕(光量大小以箭頭表示)。還有光源指示燈、電源指示燈以及量程轉(zhuǎn)換旋鈕。
光源主要提供220、254、280、340毫微米分別作為檢測(cè)核酸、蛋白、酶、多肽的光源。
濾色器由220、254、280、340毫微米譜線外尚含有其它波長(zhǎng)的譜線,通過(guò)各自所對(duì)應(yīng)的濾色片就把非譜線波長(zhǎng)以外的其它波長(zhǎng)濾去,這保證了儀器的單色性。
核酸蛋白檢測(cè)儀除測(cè)254nm、280nm外,其它性均同紫外檢測(cè)儀。
樣品池由石英玻璃管拉制而成,內(nèi)徑一般為3毫米左右,容積不大于100微升。
紫外檢測(cè)儀記錄儀
根據(jù)用戶(hù)簽訂合同而定,目前我公司配備有XWD-100型長(zhǎng)型記錄儀,LM17-A、LM14-104、XWT-1044以及3057型臺(tái)式記錄儀。用時(shí)他細(xì)參閱隨要說(shuō)明書(shū)。
本公司儀器記錄儀有以下幾個(gè)要求:
1、量程一定用10mv。
2、走紙速度為每小時(shí)3cm、6cm或12cm。
紫外檢測(cè)儀使用方法:
1、首先將主機(jī)和記錄儀二部分電路接妥,然后把主機(jī)的電源插頭插入220V電源插座上。
2、出廠前波長(zhǎng)設(shè)定280nm,若所需其它波長(zhǎng),只需在儀器右側(cè)轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)轉(zhuǎn)換旋鈕撥到實(shí)驗(yàn)所需檔。
3、按下主機(jī)電源開(kāi)關(guān)指示燈亮,若做透光度100%T測(cè)試把旋鈕(即靈敏度)撥到T檔。調(diào)節(jié)光量旋鈕,LED數(shù)字顯板上也同時(shí)顯示該數(shù)字。
4、若做光密度A測(cè)試,把量程旋鈕(即靈敏度)撥到實(shí)驗(yàn)需T檔。調(diào)節(jié)光量旋鈕,使LED數(shù)字面板顯示約為98左右附近即可。儀器預(yù)熱1.5小時(shí)左右,當(dāng)基線穩(wěn)定后,就對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)校。
5、把層析柱下端塑料管與主機(jī)進(jìn)樣塑料管相連接,出樣塑料管接到部分收集器或試管內(nèi),此時(shí)樣品池內(nèi)有洗脫液通過(guò)。
6、調(diào)節(jié)光量旋鈕,量程旋鈕放置100%T檔,使LED數(shù)字顯示為100,T撥到A檔,使LED面板上讀數(shù)為0左右,若作透光度T測(cè)試,就可在層析柱上加樣,對(duì)樣品進(jìn)行分離分析。
7、若做光密度A測(cè)試,把量程旋鈕(即靈敏度)撥到所需光密度A,調(diào)節(jié)光量旋鈕,使LED面板為0。此時(shí)記錄儀回到零點(diǎn)附近(注:零點(diǎn)附近即可,在實(shí)驗(yàn)中可自來(lái)定)。
8、如繪出圖譜峰值過(guò)小,把量程旋鈕(即敏度)撥到所需位置。
9、在測(cè)試過(guò)程中,“光量"均不再變動(dòng)。測(cè)試完畢,并用蒸餾水清洗樣品池和管道。
紫外檢測(cè)儀注意事項(xiàng)
1、汞燈的光強(qiáng)受溫度和電壓影響較大,建議用戶(hù)最好能在恒溫室內(nèi)工作或者在冰庫(kù)里工作。
2、T調(diào)零生產(chǎn)時(shí)機(jī)內(nèi)已校準(zhǔn),當(dāng)更換光電培增管后,需重新校準(zhǔn)。
3、汞燈壽命可達(dá)數(shù)千小時(shí),若發(fā)現(xiàn)記錄儀不能調(diào)到10mV,且基線一直往小的方向漂移要考慮換燈。如汞燈不亮可再按一次電源開(kāi)關(guān),汞燈就會(huì)即亮,光電培增管壽命在數(shù)千小時(shí)以上。注意開(kāi)機(jī)工作時(shí)不得拿出樣品池架,以免強(qiáng)光照射光電培增管造成損壞。汞燈發(fā)光區(qū)域和光電培增管光陰極窗口沾污時(shí),可用干凈棉芯酒精擦拭干凈。