如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據(jù)自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應體系中添加有相應的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。此外ELISA的結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發(fā)光或顯色法檢測等。
人類成纖維細胞(多種種屬)實驗科研認可品牌
白介素16ELISA試劑盒,本應用試劑盒已完成多中心臨床驗證,并通過國家食藥監(jiān)總局的認證。我司通過建立覆蓋歐美的采購中心,與歐美1000多個品牌建立了正式的代理與合作,涵蓋所有的生物試劑門類,特別是二三線高質量品牌產品,具有壓倒性地優(yōu)勢。產品領域:分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質學、細胞治療、臨床應用等領域。主營產品:流式抗體、ELISA試劑盒、標準品和對照品、生化試劑、抗體和抗原、細胞因子、技術服務、實驗耗材和消耗品、儀器設備。
● 試劑盒操作步驟如下: ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說,一抗要檢測一到兩個稀釋度,而二抗要檢測兩到三個稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點在膜上。每個點的體積越少越好(1-5μl),以保證點盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點完一次后,干燥2-5分鐘,再點一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無可見水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點,室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。 9.準備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點*濕潤,且印跡點在孵育過程中不會干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護膜上。 12.蛋白一側朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產品。
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編輯:小檀20181010
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