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分光光度計的線性校正
2015-8-28 閱讀(928)
分光光度計的線性校正
光度線性是指儀器光度測量系統(tǒng)對于照射到接收器上的光輻射功率與系統(tǒng)的測定值之間符合線性關系的程度。光度線性越好,表示光度準確性越高,也就是表明儀器能按準確的比例反映入射輻射的變化。在分光光度計中測得的光度數(shù)據(jù)都是一個相對值;它都是相對于100%或0%而言的,而100%和0%是自由設定的。如果一個光度系統(tǒng)的響應在0～100%范圍內是線性的,即可測得準確的光度值。由于分光光度計中探測器、電子線路、顯示器等非線性因素的影響,整個系統(tǒng)的光度線性必須加以校正,才能獲得準確的測定值。檢查光度線性的方法有平方比律法、比爾衰減率法、偏振器法、濾光器或濾光器組合法和旋轉扇形板法等。上述方法中,其測量結果有的與制備技術有關,有的與傳遞基準有關。采用光疊加法可以避免儀器之間的傳遞誤差,也與樣品的制備無關,并可用于整個光度范圍內,它是一種以物理原理為基礎的測定方法。
提高線性校正準確度的措施
如果接收器的特性曲線不是一個光滑而有規(guī)則的曲線,在2∶1測量點的間隙中,就可能產生錯誤,特別是在100%～50%這一段,間隔大,測定點小。為了彌補這個缺點,可以采用第二個2∶1的系列,例如以70%為起點,按照上面的方法逐點測出修正系數(shù)。當要求系統(tǒng)的線性得到更高精度的修正時,還可以建立第三個2∶1的系列,例如以85%為起點等。
線性校正中,需要把第二、第三等系列的數(shù)值補充到*系列中去,如圖4所示。Φn系列是將曲線校正到OB線上的修正系數(shù),要校正到OA直線上,需求出各系列之間的關系。當*系列測試完畢后,曲線L上的1、2、3、A點等已知了。選擇某一系列的zui大值I(Φn)由△OAΦ0和△OCΦn可計算出CΦn,修正量Δ0=I(Φn)-CΦn,其中I(Φn)為實測值,CΦn為插值后計算得到。對應的修正系數(shù)為e0=Δ0/I(Φn)。經(jīng)過推導,可知在各系列修正系數(shù)的基礎上,再加上各系列zui大值的修正系數(shù)e0,即可將各系列的修正系數(shù)補充到*系列中去了。
