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人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟
閱讀：2664 發(fā)布時(shí)間：2018-1-29人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟：
1、先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板
2、再用一定稀釋度的陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后，加底物溶液顯色，終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
實(shí)驗(yàn)的前期準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料（如：微量移液器、吸頭、醫(yī)用蒸餾水等）。
2、濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1：4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液。
3、使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
4、用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。
5、濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1：19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液。
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