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小鼠ELISA試劑盒技術(shù)基礎(chǔ)知識講解
酶免疫技術(shù)是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法，是標記免疫技術(shù)的一種。免疫技術(shù)是利用抗原抗體反應(yīng)進行的檢測方法，即應(yīng)用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑，以檢測標本中的相應(yīng)抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將抗原或抗體用可以微量檢測的標記物（例如放射性核素、熒光素、酶等）進行標記，則在與標本中的相應(yīng)抗體或抗原反應(yīng)后，可以不必測定抗原抗體復(fù)合物本身，而測定復(fù)合物中的標記物，通過標記物的放大作用，進一步提高了免疫技術(shù)的敏感性。這種標記免疫技術(shù)一般分為兩類，一類用于組織切片或其他標本中抗原或抗體的定位；另一類用于液體標本中抗原或抗體的測定。前者屬于免疫組化技術(shù)范疇，后者則稱為免疫測定。
酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標記物而分為均相和異相兩種類型，實際上所有的標記免疫測定均可分成這兩類。以標記抗體檢測標本中的抗原為例，按照簡單的形式是在試劑抗體過量的情況下進行，其反應(yīng)式如下：
Ab*Ag代表結(jié)合的標記物， Ab*為游離的標記物。如在抗原反應(yīng)后，先把Ab*Ag與Ab* 分離；然后測定Ab*Ag或Ab*中的標記物的量，從而推算出標本中的抗原量，這種方法稱為異相法。如在抗原抗體反應(yīng)后Ab*Ag中的標記物* 失去其特性，例如酶失去其活力，熒光物質(zhì)不顯熒光，則不需要進行Ab*Ag 與Ab*的分離，可以直接測定游離的Ab* 量，從而推算出標本中的Ag含量，這種方法稱為均相法。
在異相法中，抗原和抗體如在液體中反應(yīng)，分離游離和結(jié)合的標記物的方法有許多種。與放射免疫測定相類似的液相異相酶免疫技測定，在某些激素等定量測定中也有應(yīng)用。但常用的酶免疫測定法為固相酶免疫測定。其特點是將抗原或抗體制成固相制劑，這樣在與標本中抗體或抗原反應(yīng)后，只需經(jīng)過固相的洗滌，就可以達到抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)的分離，大大簡化了操作步驟。這種被稱為小鼠ELISA試劑盒EL1SA 的檢測技術(shù)成為目前臨床檢驗中應(yīng)用較廣的免疫測定方法。
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