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ELISA試劑盒加樣品解決方法

    近日山中伸彌領(lǐng)導(dǎo)的研究小組在的研究中對人類轉(zhuǎn)錄因子庫進(jìn)行了高通量篩選，從中鑒別出了一種新型轉(zhuǎn)錄因子Glis1，用Glis1取代c-Myc，與Oct3/4, Sox2, Klf4一起誘導(dǎo)小鼠和人類成纖維細(xì)胞重編程為iPS細(xì)胞。并證實相比于c-Myc，Glis1誘導(dǎo)生成的iPS細(xì)胞具有較低的致癌性。這些iPS細(xì)胞形態(tài)與胚胎干細(xì)胞（ES）極為相似，且可表達(dá)與ES細(xì)胞相似的標(biāo)記基因。當(dāng)研究人員證實移植到裸鼠中的這些iPS細(xì)胞形成了畸胎瘤。在隨后的實驗中，研究人員證實Glis1高表達(dá)于未受精的卵母細(xì)胞和胚胎單細(xì)胞中。DNA芯片分析結(jié)果顯示Glis1對細(xì)胞內(nèi)多種促重編程信號通路包括Myc, Nanog, Lin28, Wnt, Essrb以及間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化起推動作用。

1、ELISA試劑盒樣品數(shù)量不一，加樣時間長短不一
解決方法： 重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近
2、加入后未混勻
 加樣后在混勻器上充分混勻
3、酶標(biāo)儀濾光片不對或輸入波長不對
解決方法：TMB顯色用450/630波長
4、酶標(biāo)儀測定重復(fù)性差
解決方法：校對酶標(biāo)儀
5、洗滌不正確
解決方法：洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應(yīng)板面向下，垂直用力甩凈內(nèi)容物（可多甩幾次），在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機(jī)洗板時不應(yīng)有堵孔，洗滌應(yīng)充分 
6、溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱） 
解決方法：恒溫箱溫育較水浴顯色深， OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃ 
7、不慎多加或少加酶或顯色劑 
解決方法：多加時顯色深，少加則淺，用記號筆圈上，便于分析 
8、閾值附近時陰時陽