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ELISA試劑盒加樣品解決方法

    近日山中伸彌領(lǐng)導的研究小組在的研究中對人類轉(zhuǎn)錄因子庫進行了高通量篩選，從中鑒別出了一種新型轉(zhuǎn)錄因子Glis1，用Glis1取代c-Myc，與Oct3/4, Sox2, Klf4一起誘導小鼠和人類成纖維細胞重編程為iPS細胞。并證實相比于c-Myc，Glis1誘導生成的iPS細胞具有較低的致癌性。這些iPS細胞形態(tài)與胚胎干細胞（ES）極為相似，且可表達與ES細胞相似的標記基因。當研究人員證實移植到裸鼠中的這些iPS細胞形成了畸胎瘤。在隨后的實驗中，研究人員證實Glis1高表達于未受精的卵母細胞和胚胎單細胞中。DNA芯片分析結(jié)果顯示Glis1對細胞內(nèi)多種促重編程信號通路包括Myc, Nanog, Lin28, Wnt, Essrb以及間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化起推動作用。

1、ELISA試劑盒樣品數(shù)量不一，加樣時間長短不一
解決方法： 重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近
2、加入后未混勻
 加樣后在混勻器上充分混勻
3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對
解決方法：TMB顯色用450/630波長
4、酶標儀測定重復性差
解決方法：校對酶標儀
5、洗滌不正確
解決方法：洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下，垂直用力甩凈內(nèi)容物（可多甩幾次），在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔，洗滌應充分 
6、溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱） 
解決方法：恒溫箱溫育較水浴顯色深， OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應控制在37℃ 
7、不慎多加或少加酶或顯色劑 
解決方法：多加時顯色深，少加則淺，用記號筆圈上，便于分析 
8、閾值附近時陰時陽