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人Apelin-36ELISA檢測試劑盒

閱讀:179          發(fā)布時間:2014-7-17

人Apelin-36ELISA檢測試劑盒

    Apelin-36試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Apelin-36濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Apelin-36和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Apelin-36的濃度呈比例關系。

    此外,siRNA分子與DNA甲基化密切相關,尤其siRNA指導著對跳躍基因的甲基化過程。感到驚訝的是,當植物被致病菌感染激活了特定轉(zhuǎn)座子時,這些siRNA的水平也發(fā)生了改變。從而改變對基因的調(diào)控。羊ELISA試劑盒發(fā)現(xiàn)植物遭遇致病菌后,其表觀遺傳學密碼會發(fā)生廣泛的大量改變,DNA中的表觀遺傳學密碼是協(xié)助調(diào)控基因表達一種指令信息。顯示這些表觀遺傳學改變與負責調(diào)控植物脅迫應答的基因活性有關,這說明表觀基因組能幫助植物對致病菌和其他環(huán)境脅迫產(chǎn)生抗性。

操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

操作步驟

使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

    有一些基因的表達與脅迫應答中甲基化改變有關,植物的脅迫應答引發(fā)了大量的甲基化修飾改變,從而幫助植物抵御入侵的致病菌。羊ELISA試劑盒為了限制感染的致病菌生長,植物采用了一系列復雜的防御機制,激活多種激素信號來改變基因表達的網(wǎng)絡。顯示植物的這些細胞防御應答通過DNA甲基化機制控制基因表達的網(wǎng)絡。這些遺傳物質(zhì)的表觀遺傳學改變,包括DNA甲基化模式的改變和組蛋白的修飾(組蛋白在基因調(diào)節(jié)中具有關鍵作用),可以不改變DNA序列而對基因表達進行調(diào)控。

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