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技術(shù)文章

ELISA多抗和單抗的優(yōu)缺點(diǎn)比較

閱讀:385          發(fā)布時(shí)間:2015-2-12

ELISA優(yōu)點(diǎn)展示:
 1. 克隆抗體可有助于放大低表達(dá)水平的靶蛋白信號(hào),因?yàn)榘械鞍卓稍诙鄠€(gè)表位上結(jié)合不止一個(gè)抗體分子。但是這會(huì)給定量實(shí)驗(yàn)造成不利影響,因?yàn)榻Y(jié)果將變得不準(zhǔn)確。
 2. 由于能識(shí)別多個(gè)表位,多克隆抗體可在IP/ChIP中得到更好的結(jié)果。
 3. 比單克隆抗體更能容許抗原中的微小變化。
 4. 它們會(huì)識(shí)別出與免疫原蛋白質(zhì)具有高同源性的蛋白質(zhì),或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白,例如當(dāng)未測(cè)試物種中的抗原性質(zhì)未知時(shí),有時(shí)會(huì)使用多克隆抗體。這也使得檢測(cè)免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要。
 5. 多克隆抗體通常是檢測(cè)變性蛋白質(zhì)的。
 6. 多表位通??商峁└鼮橛辛Φ臋z測(cè)。
 7. 多克隆抗體不適用于探測(cè)抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因?yàn)榭寡逋ǔ?勺R(shí)別多個(gè)結(jié)構(gòu)域。
不足之處:
·易于產(chǎn)生批次間差異。
·產(chǎn)生大量非特異性抗體,有時(shí)可能在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號(hào)。
·多表位使得檢測(cè)免疫原序列以確定是否有任何交叉反應(yīng)性非常重要。
客觀事實(shí):
1. 識(shí)別任一抗原上的多個(gè)表位。獲得的血清將包含不同親和力抗體的異質(zhì)復(fù)合體混合物。
2. 多克隆抗體主要由 IgG 亞類組成。
3. 肽免疫原通常用于產(chǎn)生靶向*表位的多克隆抗體,特別適合高同源性的蛋白家族。
抗體制備:
1. 制備成本低廉。
2. 制備所需技術(shù)和技能不高。
3. 制備時(shí)間短。
4. 多克隆抗體不適用于探測(cè)抗原的特定結(jié)構(gòu)域,因?yàn)槎嗫寺】寡逋ǔ?勺R(shí)別多個(gè)結(jié)構(gòu)域。

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