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大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA 試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

閱讀:140          發(fā)布時(shí)間:2018-11-16
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注意: 1、 試劑準(zhǔn)備:準(zhǔn)備一次實(shí)驗(yàn)所需要的酶標(biāo)條,其它的可從微孔板上拆下,密封,按照說(shuō)明書(shū)要求保存,以備下次使用。

2、 加樣:實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。加樣時(shí)注意不要有氣泡,將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。加樣或加試劑時(shí),個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。因此,一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

3、 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實(shí)驗(yàn)時(shí)請(qǐng)將加上蓋或覆膜的酶標(biāo)板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā),洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài),同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的溫育時(shí)間和溫度。

4、 洗滌:充分的洗滌非常重要,在每次洗滌過(guò)程中,都要將洗滌液*甩干。洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí) 驗(yàn)過(guò)程中。

5、 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘觀察一次),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。

6、 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

7、 如果實(shí)驗(yàn)室內(nèi)濕度低于60%,推薦使用加濕器提高濕度水平。

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