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人角化細胞內(nèi)分泌因子elisa試劑盒樣本儲存和使用方法
閱讀:180 發(fā)布時間:2018-11-28人角化細胞內(nèi)分泌因子elisa試劑盒
樣本儲存: 收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
人角化細胞內(nèi)分泌因子elisa試劑盒
使用方法: 1.加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體,甩干,每個孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。 3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。 4.每孔加hrp conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。 5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。 6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。 7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。 8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(od值)。應(yīng)提前打開酶標儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。 9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。