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GM17940細(xì)胞,人骨骼肌成肌細(xì)胞

時(shí)間:2024-4-29閱讀:588

GM17940細(xì)胞,人骨骼肌成肌細(xì)胞
組成部分:細(xì)胞 T25瓶 細(xì)胞數(shù)量1-3百萬(wàn)級(jí)別+說(shuō)明書(shū)
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基:90% DMEM培養(yǎng)基+10% 特級(jí)胎牛血清
氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37

GM17940細(xì)胞,人骨骼肌成肌細(xì)胞 操作步驟:

1.75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖,.然后置于無(wú)菌操作臺(tái),打開(kāi)瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代;

2.待細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底面積80%-90%,需要對(duì)其進(jìn)行傳代,第一次傳代比例為1:2

3傳代步驟:將0.25%EDTA胰酶置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見(jiàn)細(xì)胞脫落為消化時(shí)間,記錄消化時(shí)間,以便于下次消化),消化好后加入1ml培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代。
注意事項(xiàng):
1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請(qǐng)換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)

3 對(duì)于貼壁細(xì)胞,若大部分細(xì)胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁,表明細(xì)胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁,將漂浮的細(xì)胞離心收集,用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。

4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問(wèn)題請(qǐng)于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問(wèn)題,超過(guò)時(shí)間我段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好,不免費(fèi)對(duì)后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問(wèn)題進(jìn)行售后。

5 因細(xì)胞產(chǎn)品的特殊性,如客戶對(duì)本公司細(xì)胞質(zhì)量存有疑問(wèn),請(qǐng)于收到細(xì)胞后兩個(gè)月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,超過(guò)時(shí)間段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞質(zhì)量?jī)?yōu)良,不承擔(dān)因細(xì)胞產(chǎn)生的任何責(zé)任。



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