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DC2.4 小鼠樹突狀細胞的培養(yǎng)

時間:2014-10-24閱讀:1688

DC2.4 小鼠樹突狀細胞 培養(yǎng)詳細說明:

培養(yǎng)條件:

        培養(yǎng)基類型:RPMI-1640

        FBS: 10%

        抗生素:雙抗

        培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%

收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài):如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代方法:

棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS 1-2 次。

1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時觀察細胞狀態(tài)變化,待細胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。

凍存方法:70% *培養(yǎng)基,20%FBS10%DMSO,先用現(xiàn)配。

          儲存:液氮中長期保存。

注:

觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。

在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等,請及時拍照存檔,于一周內(nèi)與我們。

 

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