慧穎生物專業(yè)供應(yīng)人GOD試劑盒，葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒；檢測目的：測量人血清、血漿、組織、細胞上清液等GOD含量水平的表達。

檢測方法：ELISA（雙抗一步夾心法）快速、精準。

規(guī)格：48T/96T

試劑盒組成成分：微孔酶標+標準品+樣本稀釋液+標準品+樣本稀釋液+檢測抗體-HRP+20×洗滌緩沖液+底物A 底物B+終止液+封板膜+說明書+自封袋

慧穎生物公司以信譽求發(fā)展，以品質(zhì)贏得信賴，自公司成立來，為大中院校、醫(yī)院、醫(yī)藥企業(yè)單位提供上百萬ELISA試劑盒，慧穎生物ELISA試劑盒指標齊全，囊括1、細胞因子檢測試劑盒：2、肝纖維化檢測elisa試劑盒：3、心肌梗塞檢測elisa試劑盒 ：4、內(nèi)分泌檢測elisa試劑盒：5、自身免疫檢測elisa試劑盒6、腫瘤標志物檢測elisa試劑盒： 7、優(yōu)生優(yōu)育檢測elisa試劑盒：8、傳染病檢測elisa試劑盒141、特種蛋白檢測elisa試劑盒二、食品安全檢驗 elisa試劑盒：三、植物病毒、細菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒四、動植物疾病診斷類如 豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測試劑盒。本公司承諾，凡屬我公司試劑盒質(zhì)量問題，我們包退換，敬請老師們放心使用。全國統(tǒng)一訂購： ！

人GOD試劑盒，葡萄糖氧化酶ELISA試劑盒 詳細說明書（原理/樣本處理要求/操作步驟/注意事項/計算方法等）

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被葡萄糖氧化酶（GOD）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的葡萄糖氧化酶（GOD）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘

取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項

1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5 倍，zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實際濃度。

4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱96孔配置48孔配置備注

微孔酶標板12 孔×8 條12 孔×4 條無

標準品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無

標準品稀釋液6mL 3mL 無

樣本稀釋液6mL 3mL 無

檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無

20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說明書進行稀釋

底物A 6mL 3mL 無

底物B 6mL 3mL 無

終止液6mL 3mL 無

封板膜2 張2 張無

說明書1 份1 份無

自封袋1 個1 個無

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、0.5、1、2、4、8 ng/mL

試劑的準備

20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20 稀釋，即1 份的20×洗滌緩

沖液加19 份的蒸餾水。

洗板方法

1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5 次。

2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5 次。

操作步驟

1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔。標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5 次（也可用洗板機洗板）。6. 每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min 內(nèi)，在450nm 波長處測定各孔的

OD 值。

結(jié)果判斷

繪制標準曲線：在Excel 工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應(yīng)OD 值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1. 準確性：標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于0.1 ng/mL。

3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6 個月

免責聲明

1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。

2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。