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拜力為您介紹流式細(xì)胞技術(shù)檢測法

閱讀:246      發(fā)布時(shí)間:2013-10-25
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1. 3流式細(xì)胞技術(shù)檢測法
原理:
包繞著鞘液的單細(xì)胞或微粒經(jīng)過流式細(xì)胞儀檢測區(qū)域時(shí)被激發(fā)光激發(fā)出熒光信號(hào),形成的不同波長熒光信號(hào)被光電倍增管接收后轉(zhuǎn)換為電信號(hào)并進(jìn)一步轉(zhuǎn)換成計(jì)算機(jī)可識(shí)別的數(shù)字信號(hào)。其應(yīng)用范圍廣泛,常用于細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)等領(lǐng)域。
應(yīng)用:
1)了解細(xì)胞大小及顆粒度
2)細(xì)胞狀態(tài):pH 值、氧化還原、氧自由基、Ca2+
3)細(xì)胞表面蛋白:CD 系列等
4)細(xì)胞內(nèi)蛋白:胞內(nèi)因子、P53等
5)細(xì)胞功能檢測:細(xì)胞周期、凋亡 、分化、細(xì)胞增殖活力、吞噬功能、藥物泵的功能
7)免疫表型分析
流程:
1)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要預(yù)處理待檢測細(xì)胞
2)上機(jī)檢測相關(guān)參數(shù)
3)對所得結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析
4)細(xì)胞分選流程(略)
基礎(chǔ)背景:
l 提供背景資料,包括蛋白的表達(dá)位置,如是否膜蛋白或胞漿蛋白等
l 需要檢測的細(xì)胞,每種樣本提供的細(xì)胞數(shù)量要大于5×105
l 連接有或可連接熒光染料的一抗,并表明來源和應(yīng)用濃度
 

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