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在使用暗視場顯微鏡時，用戶當(dāng)注意哪些？
閱讀：946 發(fā)布時間：2019-6-11
暗視場顯微鏡主要用于觀察結(jié)構(gòu)和折射率變化有關(guān)的物體，如硅藻、放射蟲類、細(xì)菌等具有規(guī)律結(jié)構(gòu)的單細(xì)胞生物以及細(xì)胞中的線狀結(jié)構(gòu)，如鞭毛、纖維等。用暗視場顯微鏡還可觀察到物鏡分辨極限以下的質(zhì)點，但不適用于觀察染色的標(biāo)本。
在使用暗視場顯微鏡時，用戶當(dāng)注意以下幾點：
1、制作暗視場光擋時，若光擋直徑過小或光擋的中心位置不正，則不能全部擋掉直射光，視野不暗，樣品與背景的明暗反差不明顯;若光擋直徑過大，聚焦到樣品上的光線不足，使暗視野顯微鏡觀察到的樣品亮度不佳，影響觀察效果。
2、使用暗視野顯微鏡時，照明光源的照明強(qiáng)度要高，否則樣品的反射光強(qiáng)度不夠，影響觀察效果。
3、若視場中樣品與背景明暗反差不強(qiáng)時，可以上下調(diào)節(jié)聚光器的位置，使視場內(nèi)的反差提高。
4、要求使用的載玻片和蓋玻片必須無劃痕且無灰塵，物鏡前透鏡也必須清潔無塵。載玻片與蓋玻片的厚度應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)。載玻片太厚，聚光器的焦點將落在載玻片內(nèi)，達(dá)不到被檢物體的平面上;使用油鏡頭時，由于物鏡的工作距離很短，甚至無法調(diào)焦，從而看不到或看不清被檢物體。
5、物鏡的數(shù)值孔徑必須小于聚光器的數(shù)值孔徑，否則會因物鏡的孔徑角大于暗視野顯微鏡聚光器所形成的照明光束中心暗區(qū)的角度，致使部分照明光線射入物鏡，破壞或降低了暗視場的照明。
6、載玻片的厚度要適宜，照明光束經(jīng)暗視野顯微鏡聚光器后，產(chǎn)生空心照明光錐，即中心為暗區(qū)。而反射光的焦點在聚光器上透鏡表面之上，很短的距離。因此，載玻片的適宜厚度為0.8～1.2mm。
7、暗視野顯微鏡鏡檢時室內(nèi)要暗，如果沒有這樣的條件，應(yīng)盡可能使用遮光裝置，以阻止目鏡周圍的光線射入。
8、在進(jìn)行油鏡鏡檢時，由于油內(nèi)的雜質(zhì)和氣泡的漫反射，會妨礙暗視野顯微鏡鏡檢效果，所以要求盡可能地除掉油內(nèi)的雜質(zhì)和氣泡。