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在使用暗視場(chǎng)顯微鏡時(shí)，用戶(hù)當(dāng)注意哪些？
閱讀：945 發(fā)布時(shí)間：2019-6-11
暗視場(chǎng)顯微鏡主要用于觀察結(jié)構(gòu)和折射率變化有關(guān)的物體，如硅藻、放射蟲(chóng)類(lèi)、細(xì)菌等具有規(guī)律結(jié)構(gòu)的單細(xì)胞生物以及細(xì)胞中的線狀結(jié)構(gòu)，如鞭毛、纖維等。用暗視場(chǎng)顯微鏡還可觀察到物鏡分辨極限以下的質(zhì)點(diǎn)，但不適用于觀察染色的標(biāo)本。
在使用暗視場(chǎng)顯微鏡時(shí)，用戶(hù)當(dāng)注意以下幾點(diǎn)：
1、制作暗視場(chǎng)光擋時(shí)，若光擋直徑過(guò)小或光擋的中心位置不正，則不能全部擋掉直射光，視野不暗，樣品與背景的明暗反差不明顯;若光擋直徑過(guò)大，聚焦到樣品上的光線不足，使暗視野顯微鏡觀察到的樣品亮度不佳，影響觀察效果。
2、使用暗視野顯微鏡時(shí)，照明光源的照明強(qiáng)度要高，否則樣品的反射光強(qiáng)度不夠，影響觀察效果。
3、若視場(chǎng)中樣品與背景明暗反差不強(qiáng)時(shí)，可以上下調(diào)節(jié)聚光器的位置，使視場(chǎng)內(nèi)的反差提高。
4、要求使用的載玻片和蓋玻片必須無(wú)劃痕且無(wú)灰塵，物鏡前透鏡也必須清潔無(wú)塵。載玻片與蓋玻片的厚度應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)。載玻片太厚，聚光器的焦點(diǎn)將落在載玻片內(nèi)，達(dá)不到被檢物體的平面上;使用油鏡頭時(shí)，由于物鏡的工作距離很短，甚至無(wú)法調(diào)焦，從而看不到或看不清被檢物體。
5、物鏡的數(shù)值孔徑必須小于聚光器的數(shù)值孔徑，否則會(huì)因物鏡的孔徑角大于暗視野顯微鏡聚光器所形成的照明光束中心暗區(qū)的角度，致使部分照明光線射入物鏡，破壞或降低了暗視場(chǎng)的照明。
6、載玻片的厚度要適宜，照明光束經(jīng)暗視野顯微鏡聚光器后，產(chǎn)生空心照明光錐，即中心為暗區(qū)。而反射光的焦點(diǎn)在聚光器上透鏡表面之上，很短的距離。因此，載玻片的適宜厚度為0.8～1.2mm。
7、暗視野顯微鏡鏡檢時(shí)室內(nèi)要暗，如果沒(méi)有這樣的條件，應(yīng)盡可能使用遮光裝置，以阻止目鏡周?chē)墓饩€射入。
8、在進(jìn)行油鏡鏡檢時(shí)，由于油內(nèi)的雜質(zhì)和氣泡的漫反射，會(huì)妨礙暗視野顯微鏡鏡檢效果，所以要求盡可能地除掉油內(nèi)的雜質(zhì)和氣泡。