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植物組織培養(yǎng)的目的原理和步驟!以及需要注意的地方有哪些

閱讀:9411        發(fā)布時間:2012-5-18

植物組織培養(yǎng)的目的原理和步驟!以及需要注意的地方有哪些


(一)目的
植物組織培養(yǎng)為一基本生物技術(shù)。植物之無土繁殖、無病毒植株生產(chǎn)、植物生理、形態(tài)、遺傳等研究,均可利用比技術(shù)為工具。而且具不受限于季節(jié)、度地、在小空間即可完成等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗及利用時地操作,令學(xué)生學(xué)習(xí)相關(guān)的知識與技巧。
(二)原理
利用細(xì)胞分化之性,以任何單胞擁有與母本相同的遺傳組成,來發(fā)育成與母本相同性狀的潛能。同理也可解釋植物的再生現(xiàn)象,不同植物種類具有不同再生能力,例如:非洲董葉插,可于切口處再生新的植株。而器官發(fā)生則是植物于再生的途徑中導(dǎo)向根或芽等器官之形成。
(三)材料
蝴蝶蘭或其他植物
(四)設(shè)備
無菌操作臺、植物組織切剪器材及捏子、70%酒精、培養(yǎng)皿、恒溫箱
(五)藥品
MS培養(yǎng)基
(六)步驟
1. 首先切取根尖或莖頂?shù)壬L點(diǎn)(這會比較好操作)。
2. 將取用部位以自來水沖洗,并將雜質(zhì)蜘蛛網(wǎng)等等,去除乾淨(jìng)。
3. 將其放入1%次氯酸鈉含1-2滴展著劑(三角瓶或血清瓶裝置),放置超音波震1-2分,而后手搖10分鐘。
4. 將使用之瓶灌使用70%酒精噴覆其外部,放入無菌操作臺內(nèi)。
5. 將瓶口先用火烤過,打開將1%次氯酸鈉倒除。
6. 用無菌水清洗2-3次,甚至直至乾淨(jìng)為止。
7. 用捏子將果夾取出,放置以消毒過培養(yǎng)皿。
8. 利用刀子將切取部位切出約0.5公分之大小,置于無菌培養(yǎng)基上。
9. 封好瓶蓋,在放置培養(yǎng)室培養(yǎng)。
(七)注意事項
1. 操作臺,先將手清洗乾淨(jìng),用酒精消毒。
2. 如果操作臺,風(fēng)是向外吹的,在操作過程中,盡量少說話,及頭部勿伸入操作臺內(nèi)。
3. 手不要揮過以打開之培養(yǎng)器皿及操作器皿。
4. 在操作過程中,操作培養(yǎng)皿常換,及刀具每次使用后,用火烤過。
5. 手上酒精未乾時,先不要操作,以免烤刀具時,火燒手。
6. 接種用的刀、鑷子、剪刀等,使用前需用酒精棉花擦拭乾淨(jìng),然后在火焰上灼燒。冷卻后,在無菌條件下,將器具在95% 酒精中浸一下,取出后放在酒精燈上燒一下,安放在玻璃架上,待冷卻后使用。
7. 可將刀放在電熱杯的開水中煮沸5分鐘,冷卻后待用。
8. 金屬用具用酒精棉花擦拭乾淨(jìng)后,風(fēng)乾。然后用紙或鋁盒,包裝好,于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌,冷卻后待用。

 

本文出自顯微鏡百科 http://www.xianweijing.org

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