国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

<del id="oowa0"></del>

歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)請(qǐng)登錄|免費(fèi)注冊(cè)|產(chǎn)品展廳|收藏該商鋪

上海北諾生物科技有限公司

中級(jí)會(huì)員·14年

聯(lián)系電話(huà)

15800960770

您現(xiàn)在的位置：首頁(yè)> 技術(shù)文章 > 【感受態(tài)細(xì)胞的制備】用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品分類(lèi)品牌

MicroBioLogics質(zhì)控菌種

SGM指示劑

Moltox 遺傳毒性（Ames）試驗(yàn)試劑

標(biāo)準(zhǔn)品

ATCC菌株

細(xì)胞株

細(xì)胞培養(yǎng)

免疫學(xué)

分子生物學(xué)

常規(guī)生化試劑

omega試劑盒

耗材和移液器

Roche

Qiagen

Promega

Merck-Millipore

Pierce

Amresco

R&D

CST

Sigma

invitrogen

上海北諾生物科技有限公司

中級(jí)會(huì)員·14年

聯(lián)系人：: 周經(jīng)理劉經(jīng)理

電話(huà)：: 021-57730393

手機(jī)：: 15800960770

傳真：: 86-021-61496710

地址：: 上海市徐匯區(qū)宜山路520號(hào)中華門(mén)大廈18樓D座

個(gè)性化：: www.bnbiotech.com

網(wǎng)址：: www.bnbiotech.com

在線(xiàn)咨詢(xún)給我留言

掃一掃訪(fǎng)問(wèn)手機(jī)商鋪

【感受態(tài)細(xì)胞的制備】用CaCl2處理制備新鮮的大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞

2013-5-15　　閱讀(2650)

分享：

1. 從37℃培養(yǎng)16~20 h 的新鮮平板中挑取一個(gè)單菌落（如大腸桿菌DH52），或1 ml 新鮮的16~20 h過(guò)夜培養(yǎng)物，轉(zhuǎn)到一個(gè)含有100ml LB培養(yǎng)基的1 L 或500 ml 培養(yǎng)瓶中。于37℃振搖培養(yǎng)約2~3 h（旋轉(zhuǎn)搖床200~300 r/min），每隔20~30 min測(cè)量OD₆₀₀值≈0.4。

2. 在無(wú)菌條件下將細(xì)菌轉(zhuǎn)移到一個(gè)，用冰預(yù)冷的50 ml 聚丙烯離心管中，冰上放置10~20 min。

3. 于4℃4000轉(zhuǎn) /分離心10 min，回收細(xì)菌細(xì)胞。

4. 將管倒置1 min，以使zui后殘留的痕量培養(yǎng)液流盡。

5. 以10 ml 用冰預(yù)冷的0.1 mM CaCl₂重懸每份沉淀，放于冰上， 4℃4000轉(zhuǎn) /分離心10 min，回收細(xì)菌細(xì)胞。

6. 每50 ml 初始培養(yǎng)物用2 ml 冰預(yù)冷的0.1 M CaCl₂重懸每份沉定，此時(shí)，可以迅速將細(xì)胞分裝成小份，液氮中冰凍，-70℃貯存?zhèn)溆谩?/a>

7. 用無(wú)菌吸頭從感受態(tài)細(xì)胞懸液中取200 μl 轉(zhuǎn)移到無(wú)菌的微量離心管中，加DNA或連接反應(yīng)混合物（體積≤10 μl，DNA≤50 ng），輕旋以混勻內(nèi)容物，冰浴30 min。

8. 將離心管放到預(yù)加溫到42℃的水浴中，90 s。

9. 將混合物快速轉(zhuǎn)移到冰浴中，冷卻1~2分鐘，加入適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基在37 ℃培養(yǎng)45 分鐘，使細(xì)胞復(fù)蘇，并表達(dá)質(zhì)粒所攜帶的轉(zhuǎn)化基因。

10. 將適當(dāng)體積（每個(gè)90 mm平板可達(dá)200 μl）已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到相應(yīng)抗生素的平板培養(yǎng)基上。

11. 將平板置于室溫至液體被吸收，倒置平板于37℃培養(yǎng)箱中，12~16 h，平板培養(yǎng)，克隆在此期間應(yīng)該出現(xiàn)，否則轉(zhuǎn)化不成功。

上一篇：【感受態(tài)細(xì)胞的制備】如何選擇進(jìn)口高

下一篇：【感受態(tài)細(xì)胞的制備】電擊和熱擊感受

上海北諾生物科技有限公司 - 主營(yíng)產(chǎn)品：免疫學(xué),細(xì)胞學(xué),分子生物學(xué),微生物學(xué),即用型試劑,常規(guī)生化試 ...

化工儀器網(wǎng)設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究 Copyright(C) http://www.duoo135.com All rights reserved

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

點(diǎn)擊刷新驗(yàn)證碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X

信息收藏成功！

該信息已收藏！

查看我的收藏夾設(shè)置標(biāo)簽

標(biāo)簽：: 保存成功
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用：

提示

X

您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

產(chǎn)品對(duì)比 二維碼 返回頂部

掃一掃訪(fǎng)問(wèn)手機(jī)商鋪

對(duì)比框

在線(xiàn)留言

搜索| 荣成市| 新宁县| 垦利县| 益阳市| 西乡县| 甘南县| 银川市| 沂水县| 丰宁| 沛县| 昌宁县| 卓尼县| 张家川| 读书| 逊克县| 马尔康县| 囊谦县| 灵武市| 明星| 凤山市| 临夏县| 宜君县| 长宁县| 衡东县| 营山县| 孟州市| 额尔古纳市| 高唐县| 鞍山市| 万山特区| 来宾市| 高雄县| 靖安县| 泾阳县| 图们市| 普安县| 河东区| 淳安县| 西峡县| 永福县|

<strike id="a2cgo"><input id="a2cgo"></input></strike>

<strike id="a2cgo"></strike>

<fieldset id="a2cgo"><table id="a2cgo"></table></fieldset>