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細(xì)胞技術(shù)專題：人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)可以：（1）獲得人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞；（2）作為重大動(dòng)脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對(duì)血管疾病的藥理學(xué)和治療繼續(xù)提供信息。實(shí)驗(yàn)方法消化法貼塊法實(shí)驗(yàn)方法原理運(yùn)用消化法進(jìn)行人臍動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)，并用倒置顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和用免疫組化對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。實(shí)驗(yàn)材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液胰蛋白酶膠原酶彈性蛋白酶DMEM儀器、耗材眼科剪滴管離心機(jī)培養(yǎng)皿CO2培養(yǎng)箱實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)步驟1.冰冷無(wú)菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔細(xì) -
細(xì)胞技術(shù)專題：兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)兔膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細(xì)胞；（2）進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定研究；（3）用于細(xì)胞學(xué)其他研究。實(shí)驗(yàn)方法酶分離法實(shí)驗(yàn)方法原理運(yùn)用顯微手術(shù)器械在肉眼下仔細(xì)剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細(xì)胞，體外原代和傳代培養(yǎng)分離細(xì)胞。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀況，同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞爬片H-E染色和透射電鏡等形態(tài)學(xué)觀察分析，并應(yīng)用免疫熒光染色平滑肌*的α-肌動(dòng)蛋白進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定分析。zui后根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和 -
細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)可以：（1）應(yīng)用于血腦屏障的研究；（2）腦血管疾病的病理生理及分子生物學(xué)研究；（3）新藥篩選；（4）腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞生理生化及藥理學(xué)研究。實(shí)驗(yàn)方法酶消化法實(shí)驗(yàn)方法原理丁香園站友參考文獻(xiàn)采用以大腦皮質(zhì)為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進(jìn)行原代培養(yǎng),，成功地摸索出大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離和原代培養(yǎng)的方法，并獲得純度較高的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)材料SD大鼠試劑、試劑盒纖連蛋白Ⅳ型膠原明膠肝素鈉堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子青霉素鏈霉素NaHC -
細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠肝星狀細(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：大鼠肝星狀細(xì)胞原代培養(yǎng)大鼠肝星狀細(xì)胞原代培養(yǎng)可以：（1）用于細(xì)胞保種；（2）用于分子生物學(xué)研究；（3）用于基因治療研究。實(shí)驗(yàn)方法胰酶消化法實(shí)驗(yàn)方法原理將小鼠的肝細(xì)胞從機(jī)體中取出，經(jīng)胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖。實(shí)驗(yàn)材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液D-Hanks'液酚紅臺(tái)盼蘭HBSS氯化鈉PBS儀器、耗材手術(shù)刀手術(shù)剪尼龍網(wǎng)相差顯微鏡熒光顯微鏡實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備1.動(dòng)物：雄性SD大鼠(體重250 -
細(xì)胞技術(shù)專題：腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)可以：（1）研究癌變機(jī)理；（2）研究抗癌藥檢測(cè)；（3）研究癌分子生物學(xué)；（4）用于闡明和解決癌癥。詳細(xì)實(shí)驗(yàn)方法組織塊法酶消化法脫落細(xì)胞法實(shí)驗(yàn)方法原理腫瘤細(xì)胞的原代培養(yǎng)與正常細(xì)胞的原代培養(yǎng)的條件基本相似。一般常用原代細(xì)胞的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，10%血清濃度即可，在原代培養(yǎng)時(shí)需加入原代細(xì)胞培養(yǎng)的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利細(xì)胞生長(zhǎng)。用細(xì)胞生長(zhǎng)因子如胰島素、松、雌激素等等。也可以考慮動(dòng)物媒介培養(yǎng)。根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子。實(shí)驗(yàn)材料瘤組織試劑、 -
細(xì)胞技術(shù)專題：staurosporine誘導(dǎo)小鼠心肌細(xì)胞凋亡模型構(gòu)建
原代心肌細(xì)胞的培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)方案取出生后0~24hC57BL/6cr小鼠心臟，按改良的Lader方法進(jìn)行細(xì)胞的分離。獲取博動(dòng)的心臟迅速放置于無(wú)Ca2+、Mg2+的Hank’s平衡液中。剪碎心臟，放置在4℃條件下100g/L的Trypsin溶液中消化16~18h，用Trypsin抑制劑中止消化。然后在37℃下，用膠原酶Ⅱ于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，在搖床上繼續(xù)孵化消化45~60min，zui后用70μm直徑尼龍過濾網(wǎng)過濾獲取心肌細(xì)胞，用含有25mmol/LHCO3-，100mL/LFSB，1×105u/L青霉素 -
細(xì)胞技術(shù)專題：腫瘤細(xì)胞的軟瓊脂集落培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：腫瘤軟瓊脂集落在體外培養(yǎng)基中由一個(gè)祖先細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞團(tuán)，稱之為集落。腫瘤細(xì)胞能無(wú)限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細(xì)胞則不能形成集落。實(shí)驗(yàn)方法基本方案實(shí)驗(yàn)方法原理HL-60細(xì)胞是一種急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞，在體外無(wú)需加刺激因子，可在軟瓊脂培養(yǎng)基中形成集落。二甲基亞砜是一種細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑，經(jīng)二甲基亞砜處理后的HL-60細(xì)胞按粒系途徑定向成熟分化，同時(shí)細(xì)胞的增殖力降低，幾乎全部細(xì)胞喪失了軟瓊脂中形成集落的能力。因此，這種方法可用于細(xì)胞分化的基礎(chǔ)研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗(yàn)等方面。實(shí)驗(yàn) -
細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)實(shí)驗(yàn)方法原理水合氯醛腹腔麻醉，采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島，并分離、培養(yǎng)胰島單細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)材料一周齡Wistar大鼠試劑、試劑盒D-Hanks’液胰蛋白酶Ⅴ型膠原酶葡萄糖碘乙酸儀器、耗材手術(shù)剪手術(shù)鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術(shù)刀片培養(yǎng)皿實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)步驟1.一周齡Wistar大鼠，斷頸處死，于75%乙醇浸泡15分鐘，無(wú)菌取出胰腺，于冰冷無(wú)菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔細(xì)清除脂肪、包膜、血管等胰外組織，轉(zhuǎn)入青霉素小瓶中。2.
