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ELISA試劑盒的測定結(jié)果和標(biāo)準(zhǔn)相差太大怎么辦？
閱讀：6284發(fā)布時間：2019-5-28
ELISA試劑盒測定值與文獻(xiàn)中相差太大怎么辦，下面看看我們來仔細(xì)說說：
（1）生化測定主要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標(biāo)的變化。同時，要測定值，往往是很可能甚至不可能的。因此，追求的不是值而是相對值。
?。?）用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異。因此，如果測定方法不同，同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用試劑盒測定的理由之一。因?yàn)椴煌髡哂猛辉噭┖袦y定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的。
?。?）同一種材料，不同處理、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標(biāo)可能發(fā)生很大變化。因此，能夠直接用來比較的文獻(xiàn)資料本來就不多。
?。?）當(dāng)然，話說回來，測定值如果與文獻(xiàn)報道相差太大，首先應(yīng)該檢查單位是否一致，包括摩爾還是毫摩爾，是干重、鮮重還是蛋白質(zhì)濃度，是分鐘還是秒，等等。其次，檢查計(jì)算是否有誤？較后，如果相差不是數(shù)量級，通常是很正常的。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處理也是尤為重要的，今日，下面為大家分享ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果的小建議：
1.ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔，然后計(jì)算每個濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值，復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
3.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。以減去本底后的OD值為X軸，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法（比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等）并從中選擇一條較合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合，可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù)，將對應(yīng)的OD值帶入該方程，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近（+/-10%）。選擇擬合度較高的那條曲線。
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