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ELISA試劑盒試驗中出現(xiàn)的差錯如何糾正?

閱讀:1726發(fā)布時間:2020-1-25

       ELISA試劑盒的使用過程中,有時會出現(xiàn)一些差錯,那這些差錯如何糾正呢,我們需要找出原因。ELISA試劑盒操作過程多,新手操作不免會有過失。而這些過失許多是由細(xì)節(jié)不夠好構(gòu)成的,削減過失的方法有許多,下面我們就來說說ELISA試劑盒試驗中出現(xiàn)的差錯的糾正方法。
  1. 評價試劑的實用性,試劑的穩(wěn)定與否,對率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品重復(fù)對比試驗,斷定試劑符合要求后方可運(yùn)用。
  2. 操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)峻依照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改善的當(dāng)?shù)?,重?fù)試驗斷定成立后才干改善,比如洗板次數(shù)的掌握等。
  3. 加樣要、快速。加樣不,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色作用。其他,顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和間斷液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)穩(wěn)重。要求在必定時刻內(nèi)加樣完畢的試驗,假如加樣緩慢,便呈現(xiàn)過失,而且試劑長時刻顯露在外,特別室溫過高時,保存期會縮短乃至失效。
  4. 查驗技師應(yīng)具有從事試驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作試驗儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問題的才干,對試驗中呈現(xiàn)的意外狀況能及時妥善解決。
  5. 運(yùn)用校對過的微量移液器,清掃天然過失。移液器與否對定量檢測尤為重要。
  6. 嚴(yán)峻掌握顯色時刻,顯色時刻過短,參加間斷液反應(yīng)間斷后,底物結(jié)合物的量過少,易呈現(xiàn)假陰性。超越顯色要求時刻后顯色,應(yīng)判為假陽性,這或許與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,不可報陽性,這或許是本底顯色的作用。
  7. 洗刷*,洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。其他,洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許呈現(xiàn)假陽性。
  8. 嚴(yán)控反應(yīng)時刻,反應(yīng)時刻過長,酶失活;反應(yīng)時刻過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松懈不強(qiáng)健,簡略洗掉,都或許構(gòu)成假陰性。

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