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VX2細胞株的培養(yǎng)與操作

閱讀:553發(fā)布時間:2024-10-14

  VX2細胞株,也被稱為VX2兔間變表皮鱗癌瘤株,是一種重要的科研用細胞株。
 
  VX2細胞株特性與參數:
 
  細胞形態(tài):成纖維細胞樣
 
  生長特性:貼壁生長
 
  含量:通常大于1x10^6個/mL
 
  污染檢測:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
 
  培養(yǎng)基:常用EMEM培養(yǎng)基添加10%的胎牛血清(FBS),也有使用DMEM+10%FBS或89%EMEM+10%FBS+1%雙抗等配方
 
  傳代方法:傳代比例通常為1:2至1:4,傳代后兩天左右換液
 
  凍存條件:使用90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO(或92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO)進行凍存,液氮儲存
 
  VX2細胞株培養(yǎng)與操作:
 
  復蘇細胞:將含有細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入培養(yǎng)基混合均勻后離心,棄去上清液,補加培養(yǎng)基后吹勻,然后接種至培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。
 
  細胞傳代:當細胞密度達到80%-90%時,可進行傳代培養(yǎng)。傳代過程中需要使用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞,加入適量的胰酶進行消化,待細胞大部分變圓并脫落后加入培養(yǎng)基終止消化,然后進行離心、重懸和接種。
 
  細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。凍存前需要棄去培養(yǎng)基,使用PBS清洗一遍后加入胰酶進行消化,細胞脫落后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,然后進行離心、重懸和凍存。

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